黄芪、丹参配伍提取物对高脂血症大鼠TNF-α-TNFR-PI3K信号转导通路影响的研究.pdf

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1、第15卷第10期2015年4月科学技术与工程Vo1．15No．10Apt．2015l67l一1815(2015110-0155·04ScienceTechnologyandEngineering@2015Sci．Tech．Engrg．黄芪、丹参配伍提取物对高脂血症大鼠TNF—ct-TNFR-PI3K信号转导通路影响的研究李梦华张璨方毛秉豫(南阳医学高等专科学校，南阳473004；南阳理工学院张仲景国医学院，南阳473000)摘要观察黄芪、丹参配伍提取物对高脂血症大鼠TNF．ct-TNFR．PI3K信号转导通

2、路的影响。6O只Wistar雄性大鼠随机分为空白组1O只，余下造模成功后随机等分为模型组、阳性对照组、黄芪、丹参配伍提取物高、中、低剂量组，相应药物灌胃。28天后分别心脏取血检测血脂及取肝脏组织检测TNFR、PBK、磷酸化PBK蛋白的表达。结果：1)黄芪、丹参配伍提取物高、中剂量组明显降低TC、TG、LDL及ADoB，提高HDL、ApoAI；2)空白组、阳性对照组和黄芪、丹参配伍提取物高、中剂量组明显表达PI3K、磷酸化PI3K和TNFR蛋白。黄芪、丹参配伍提取物可以有效调节血脂水平，其作用机制与增强TNF

3、．Ot．TNFR．PI3K信号转导通路表达有关。关键阔黄芪丹参高脂血症PBK中图法分类号R285．5；文献标志码A黄芪、丹参配伍提取物在前期大量临床及实验2方法研究中已经证实对冠心病、心衰、心梗等有较好的预防和治疗作用H。本实验再次通过模拟高脂血症2．1模型建立及给药模型探讨黄芪、丹参配伍提取物对高脂血症的治疗60只大鼠常规饲养一周，取血前一天禁食不禁机制，为今后其临床应用提供实验依据。水。次日中午，大鼠眼内眦取血检测血脂水平。随机选取50只大鼠高脂饲料喂养两周后再次测血脂1材料水平J，与喂饲高脂饲料前对比

4、确定是否形成高1．1实验动物脂血症模型。造模成功后随机等分成5组，按2．5Wistar雄性大鼠60只，6周龄，体重(180±10)g／(kg·d)、5g／(kg·d)、10g／(kg·d)，相当推荐g，由河南中医学院实验动物中心提供，常规饲养。量的5、l0、20倍，分为低、中、高3个剂量组，模型组1．2实验药物、试剂及仪器和阳性对照组(5倍等效日剂量(O．135／kg)。实验期黄芪、丹参提取物由南阳理工学院方药研究所间，除正常组外各组均用高脂饲料喂饲。各实验组大提供，经水提、大孔吸附树脂纯化所得，纯化后提取

5、鼠灌胃给予相应药物，模型组给予生理盐水。每天一物含量>6o％；辛伐他汀片(杭州默沙东制药有限次，连续4周，每周称重一次，依此调整灌胃量。公司)；载体蛋白AI和载体蛋白B检测试剂盒(南2．2采集样品和检测京森贝伽生物科技有限公司)；PBK抗体，磷酸化实验结束后各组大鼠禁食不禁水16h，心脏处PBK抗体，TNFR抗体(上海谷研科技有限公司)；取血，2500r／rain离心10min，分离血清于一80℃AMS-300全自动生化分析仪(北京奥普森公司)；J2．冰箱保存，试剂盒测定TC、TG、LDL—C和HDL．C。

6、MC离心机、UniCelDxI800全自动化学发光免疫分取肝脏组织，匀浆、离心取上清，采用Westernblot常析仪(美国贝克曼库尔特有限公司)等。规检测方法进行检测。2．3统计学处理统计学处理使用SPSS18．0统计软件，实验数2014年l1月13日收到国家自然科学基金面上项目据以(±s)表示，组间比较用方差分析。P<0

7、05(81173372)资助表示差异有统计学意义。第一作者简介：李梦华，硕士，助教。研究方向：中医内科教学及实验。E-mail：359994184@qq．corn。3结果介：毛秉豫，博

8、士，教授口研究方向沁血管疾病的气3血并治方药．1各组大鼠体重变化‘‘日Ⅱ、刚rfI-叉。由表1，实验前各组大鼠体重无显著性差异(P>l56科学技术与工程15卷0．05)，实验结束时黄芪、丹参配伍提取物各组大鼠AB

9、)p-PI3K____—-_一_鳓。。一——．体重略有降低，实验过程中各组大鼠的增重差异均没有显著性(P>0．05)，表明黄芪、丹参配伍提取物PI3K——一～嘲嘲㈣∞嘲鳓自嘲_一蛐——__对实验大鼠体重增长没有明显影响。TNFR■■州一嘲_———_-表1各组大鼠实验前后体重值／gTable1The

10、bodyweightofratsineachgroupbefore口-actin州_嗍___州_嘲_—_——埔__andafterexperiment／g注：A空白组B模型组C阳性对照组，J低剂量组E中剂量组F高剂量组图l各组大鼠PI3K、磷酸化PI3K和TNFR蛋白表达Fig．1RatsofgroupPDK、theexpressionofphosphorylatedPI3KandTNFRprotein得高脂血症