猫棒束孢多糖对小鼠S180肉瘤和H22肝癌的抑制作用.pdf

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1、中国药物与临床2015年2月第15卷第2期ChineseRemedies&Clinics，February2015,Vo1．15,No．2·185·——猫棒束孢多糖对小鼠S180肉瘤和H22肝癌的抑制作用杨喜花张蕻任连生陈丽霞白喜花猫棒束孢(Isariafelina)是从天然冬虫夏草虫草体中经菌棒束孢多糖(IFP)。种分离后培养得到的一株真菌，经中国科学院微生物研究所1．2．2肿瘤动物模型的建立：将生长良好的小鼠S180肉瘤、郭英兰教授鉴定为Isariafelina(DC．：Fr．)Fr．，是一种新的冬虫小

2、鼠H22肝癌组织瘤块，在无菌条件下加生理盐水，用消毒夏草菌种，已被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物的玻璃研磨器制成所需浓度的细胞悬液浓度为lxlOT／ml，过中心保藏(保藏号：CGMCCNO．0706)。大量的研究报道，许滤后分别接种于小鼠右腋下皮下，每只小鼠接种0．2ml瘤多真菌多糖均具有抗肿瘤生物活性，为验证猫棒束孢真菌多液。糖是否也具有抗肿瘤生物活性[1_5]．我们开展了猫棒束孢多糖1．2．3动物分组及给药：接种瘤液次日按体质量将动物随机对移植性$180肉瘤及H22肝癌的抑制作用研究，分为5组，

3、分别为阴性对照组、丝裂霉素西药阳性对照组、鸦1材料与方法胆子油中药阳性对照组、IFP高剂量组、IFP中剂量组、IFP低1．1材料剂量组，每组9只动物。于接种24h后开始给药，阴性对照1．1．1动物：无特定病原菌(SPF)级昆明小鼠108只，体质量组动物每天灌胃给予蒸馏水0．2ml，鸦胆子油组动物每天灌2022g，雄性，由山西省肿瘤研究所动物实验室繁殖，实验动胃给予鸦胆子油8ml／kg，IFP高剂量组动物每天灌胃IFP物生产许可证号：SCXK(晋)2012．0001；实验动物使用许可证200mg&g，IFP中

4、剂量组动物每天灌胃IFP100mg&g，IFP低号：SYXK(晋)2012．0001。饲养温度为20～26℃，湿度40％～剂量组动物每天灌胃IFP50mg／kg；丝裂霉素组小鼠腹腔注60％，12h／12h照明，自由饮水，饲喂无菌全价营养颗粒饲料射丝裂霉素1mg／kg。分别于实验第2天、第6天各注射1(北京科澳协力饲料有限公司)。次，共注射2次。I．1．2试剂：注射用丝裂霉素由浙江海正药业股份有限公司接种S180细胞和H22细胞的昆明小鼠连续灌胃给药生产，产品批号为110601；鸦胆子油口服乳液由沈阳药大药1

5、0d，于末次给药次日称质量并处死动物。剥离瘤块称湿质业有限责任公司生产，生产批号为1103112。量，所得数据经统计学处理，计算瘤质量抑制率(％)。1．1．3瘤株：小鼠S180肉瘤细胞：购于中国药品生物制品检1．3统计学方法定所，小鼠H22肝癌细胞：河北医科大学实验动物中心馈赠。采用SPSS17．0统计软件进行数据统计分析。采用单因素1．2实验方法方差分析，组间比较采用最小显著差异法(ISD)，实验数据以1．2．I猫棒束孢多糖的制备：猫棒束孢是从天然冬虫夏草虫蜘表示，以P

6、中经菌种分离后培养得到。培养方法：每瓶装将500ml2结果培养基(蛋白胨0．6％，酵母膏1．2％，蔗糖2．4％，MgSO2．1IFP对移植性S180肉瘤的抑制作用：IFP对小鼠移植性0．05％，用0．1％KH2PO4调整pH为6．5～7．0)装于3000ml三S180肉癌的抑制作用见表1，由表1可见．IFP对小鼠移植性角瓶中，牛皮纸封口，125℃高压灭菌40min，冷却至室温，接S180肉瘤具有显著的抑制作用，其抑瘤效果呈现一定的剂量入菌种，置于180r／min摇床上，于23～27℃条件下旋转发酵依赖性，其

7、中，IFP高剂量和IFP中剂量的抑瘤效果与阴性对培养72h，收集发酵液，将发酵液于2000r／min离心5min，照组相比较差异具有统计学意义(P<0．05)。收集菌丝体，将菌丝体于80C烘干后粉碎，过100目筛。2．2IFP对移植性H22肝癌的抑制作用：IFP对小鼠移植性取300g菌丝粉。加入1200ml蒸馏水。沸水浴提取90H22肝癌的抑制作用见表2，由表2可见，IFP对小鼠移植性min，3000r／min离心5rain；重复提取2次；合并3次提取的H22肝癌具有显著的抑制作用，其中，IFP高剂量组瘤重

8、与阴上清液，将上清液水浴浓缩至900ml；加入浓缩液3．75倍的性对照组相比较差异具有统计学意义(p<0．05)，随着IFP剂95％乙醇，充分混匀，沉淀过夜；取沉淀，于7O烘干，即得猫量的降低，抑瘤率明显下降，因此，IFP对H22肝癌的抑制效DOI：10．11655~gywylc2015．02．013果呈现一定的剂量依赖性。作者单位：030013太原，山西医科大学附属肿瘤医院比较医学3讨论部(杨喜花、任连生、陈丽