脱细胞肝支架的结构和成分对细胞相容性的影响.pdf

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1、·2082·2013年l0月第30卷第lO期ChinJExpSuOctober2013、Vo1.30.No.10,·朋F脏夕卜科·脱细胞肝支架的结构和成分对细胞相容性的影响姜楠季茹韩炜王建锋李伟民曹阳张勇窦科峰【摘要】目的比较不同方法制备脱细胞肝支架(DLBS)的结构和成分以及细胞相容性,探讨其内部联系。方法取50只成年F344大鼠肝脏,使用文献报道的3种方法[以十二烷基硫酸钠(SDS)、TritonX一100和NP40为主洗脱剂]制备大鼠DLBS。进行扫描电镜和孑L径计算和氨基葡聚糖(GAG)检测。后经门静脉灌注肝卵圆细胞,进行黏附率、增殖情况、免疫荧光、扫描电

2、镜以及白蛋白分泌检测。结果大体观察、扫描电镜及孔径计算表明NP40方案细胞外基质较SDS和TritonX一100方案整齐;GAG检测NP40方案[(44.19±3.35)rig/mg]高于TritonX-100方案[(36.71±2.01)ng/mg]和SDS方案[(21.63±2.78)ng/mg];细胞黏附率显示NP40方案[(95.784-2.11)%]高于SDS方案[(84.18±3.30)%]和TritonX一100方案[(91.15±2.21)%];细胞增殖情况TritonX一100方案和NP40方案的细胞增殖速度显著高于SDS方案(P<0.05);白

3、蛋白分泌NP40方案[(85.77±3.30)mg/10。个细胞]明显好于SDS方案[(49.37±2.43)mg/10。个细胞]和TritonX一100方案[(74.66±4.80)mg/10。个细胞]。结论DLBS的结构和成分对支架的细胞相容性具有明显的影响,同时也明显观察到NP40方案较SDS和TritonX一100方案在制备DLBS的优势。【关键词】脱细胞肝支架;组织工程;细胞外基质;卵圆细胞EfectsofstructureandcompositionofdecellularizedliverbioleIgicalscafoldsoncytocompat

4、ibilityJIANGNan,JlRu,HANWet,WANGJian-feng,LI—min,CAO,ZHANGng,DOU.DepartmentofHepatobilliarySurgery,XijingHospital,ForthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710032,ChinaCorrespondingauthor:_,,Ru,Email:hbsurgerypaper@gmail.corn【Abstract】0bjectiveTocomparethebiocompatibilityofdecellularizedliv

5、erbiologicalscaffolds(DLBS)madebydiferentmethodsanddiscussingthecorrelationbetweenthem.MethodsDecellularizedliverbiologicalscaffoldsweremadebytransfusingliversof50matureF344ratswiththreedifferentways.Glyc0saminoycan(GAG)inthescaffoldswastested,andscanningelectronmicroscope(SCM)andcyto

6、—toxicityassayswerealsousedonthescaffolds.Theliverovalcellsweretransfusedintoscaffoldsthroughtheportalvein.Cellsonthescaffoldswereexaminedbyimmunofluorescenee(IF).scanningelectronmi—croscope,cellsadhesiontestandalbuminexcretiondetection.ResultsScaffoldsmadebytheMethodChadbetterorderli

7、nessthanothertwomethodsingrossobservation.scanningelectronmicroscopyandporesizecalculation.TheMethodCI(44.19±3.35)ng/mghadsignificantlymoreGAGthantheMethodA[(21.63±2.78)ng/mg]andMethodB[(36.71±2.01)ng/mg].ThescaffoldsmadebytheMethodC[(95.78±2.11)%]hadhighercollagenthaninthosemadebythe

8、Metho

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