硒化卡拉胶联合表阿霉素对肝癌HepG-2细胞增殖及细胞周期的影响.pdf

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1、食品与药品FoodandDrug2014年第16卷第2期硒化卡拉胶联合表阿霉素对肝癌HepG．2细胞增殖及细胞周期的影响凌娜，孙庆岩，徐艳艳，周晓君，邓丹，陈春影，(1．哈尔滨商业大学理科研究院，黑龙江哈尔滨150076；2．国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心，黑龙江哈尔滨150076)摘要：目的观察硒化卡拉胶(KSC)和表阿霉素(EPI)联合应用对人肝癌HepG一2细胞生长及细胞周期的影响，并探讨其作用机制。方法MTT(噻唑蓝)比色法测定KSC#IEPI对HepG．2细胞增殖的影响，计算半数抑制浓度Ic值及金式指数q判断两者

2、联合作用效果；用倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测药物对细胞周期的影响；Westernblot法检测细胞周期蛋(3CyclinA和Cdc25A、细胞周期蛋白依赖性激酶Cdk2的表达水平。结果KSC~QEPI可明显抑制HeDG一2细胞增殖，且有剂量依赖性。联合组的抑制效果更显著，且优于单一用药组。EPI单独用药48h的IC值为3．612mg／L，与30mg／LKSC联合用药的IC。值降至0．807mg／L，q值判断两药联合表现为相加作用。倒置显微镜观察给药后细胞形态发生变化，联合组细胞膜破裂呈坏死状。流式细胞术结果表明，

3、两药均可导致S期周期阻滞。Westernblot结果显示两药均可使CyclinA、Cdc25A和Cdk2蛋白表达下调，联合给药组下降更明显。结论KSC和表阿霉素可抑制肝癌HepG一2细胞增殖，引起细胞周期S期阻滞，两药联合具有相加效应，这与其调节细胞周期相关蛋白的生成关系密切。关键词：硒化卡拉胶；表阿霉素；肝癌HepG．2细胞；细胞周期中图分类号：R735．7文献标识码：A文章编号：1672．979X(2014)02．0081．04EffectofKappa-selenOcarrageenanCombinedwithEpirub

4、icinonProliferationandCellCycleofHepG．2CellsLINGNa，SUNQing—yan’，xuYan—yan’，ZHOUXiao~un，DENGDan，CHENChun-ying‘’(1．ScienceResearchInstitute，HarbinUniversityofCommerce，Harbin150076，China；2．EngineeringResearchCenterofNaturalAnticancerDrugs，MinistryofEducation，Harbin15007

5、6，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectandmechanismofkappa-selenocarrageenan(KSC)combinedwithepirubicin(EPI)ontheproliferationandcellcycleofahumanhepatomacelllineHepG．2．MethodsTheanti．proliferativeeffectonHepG．2cellswasdeterminedbyMTTassay．ICnvalueswerecalcu

6、latedandKing’sformulawasusedtoevaluatetheinteractionofdrugcombination．Themorphologicalchangeswereobservedunderinvertedmicroscopy．Cellcyclewasmeasuredbyflowcytometry．ExpressionofcyclinA，cdc25Aandcdk2weredetectedbywestemblotting．ResultsKSCandEPIalonecouldinhibitcellpro

7、liferationonHepG一2cellsinadose—dependentmanner,andthecombinationgroupinhibitedmoresignificantlythanthetwodrugsdidalone．Qvaluesdemonstratedanadditiveeffect．ICnvalueofEPIonHepG．2cellsfor48hwas3．612mg／L，itdecreasedto0．807mg／Lwhilecombinedwith30mg／LKSC．Inaddition，morphol

8、ogiesofHepG一2cellswerechangedafterexposuretothedrugs，andcellmembraneswererupturedandnecrosis．1ikeincombinationgroup．Flowcytometryre