常用10种培养基的配置和质控标准.pdf

常用10种培养基的配置和质控标准.pdf

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1、.小结:常用10种培养基的配置和质控标准(1)基础肉汤成分和配制方法:蛋白胨10gNaCl5g牛肉膏5g酵母膏3gDW1LpH7.4~7.615磅30min高压灭菌,倾注无菌试管备用。每次新配制时做质控阳性质控:ATCC25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中,35℃温箱24h肉汤混浊。无菌试验:<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h培养,无细菌生长。平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养要求不高的细菌增菌用;作其他选择培养基的基础液。储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。培养基:2-8℃保存一个月

2、(2)普通营养琼脂成分和配制方法:基础肉汤100ml琼脂2g15磅30min高压灭菌,倾注平板备用。注:可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉,按上面的说明配制。...质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上,35℃温箱24h细菌生长良好。无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养要求不高的细菌。作无糖基础培养基。加血成血平板。加血加热75℃以上,再加上生长添加剂就成巧克力平

3、板。储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。培养基:2-8℃保存半个月(3)葡萄糖肉汤成分和配制方法:蛋白胨10g朊胨10gNaCl5g牛肉膏5g酵母粉3g葡萄糖4g枸橼酸钠3g硫酸镁3gDW1LpH7.2~7.4...0.4%酚红5ml15磅30min高压灭菌,备用质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中,35℃温箱24h肉汤混浊。无菌试验:<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h培养,无细菌生长。平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养

4、要求不高的细菌增菌用。6储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。培养基:2-8℃保存一个月(4)血液琼脂平板成分和配制方法:(法国生物梅里埃成品培养基)4g琼脂基础+100mL蒸馏水高压灭菌(15磅、121℃)20min冷却至50℃加入5%-10%无菌羊(兔)血倾注于无菌平皿内(φ9mm)每一个平皿分装13~15ml。质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC6303肺炎链球菌(或质控菌株)和ATCC25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂,35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC25923金黄色葡萄球菌为β

5、溶血。无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做...用途:供分离培养营养要求较高的细菌。储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。培养基:2-8℃保存半个月注意事项:制备血平板时,温度必须适宜,琼脂应冷至50℃左右,如温度过高,可使血液变色不易观察溶血,温度过低,琼脂凝固与血液不易混合。使用的血液以羊血,兔血为好,不宜使用人血,因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意,但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。(5)血液琼脂平板

6、(国产)普通营养琼脂粉3.8克+100ml蒸馏水10%葡萄糖0.6ml血液6~10ml冷却至50℃加入5%-10%无菌羊(兔)血倾注于无菌平皿内(φ9mm)每一个平皿分装13~15ml。质控方法阳性质控:ATCC6303肺炎链球菌(或质控菌株)和ATCC25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂,35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC25923金黄色葡萄球菌为β溶血。无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供分离培养营养要求较高的细菌

7、。储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。培养基:2-8℃保存半个月注意事项:...制备血平板时,温度必须适宜,琼脂应冷至50℃左右,如温度过高,可使血液变色不易观察溶血,温度过低,琼脂凝固与血液不易混合。使用的血液以羊血,兔血为好,不宜使用人血,因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意,但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。(6)巧克力平板成分和配制方法:基础肉汤100ml琼脂粉1.5g无菌脱纤维兔血10ml方法:高压灭菌后,冷至80—85

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