紫外可见分光光度计课件.ppt

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1、普析通用紫外/可见分光光度计主讲人董韬分光光度法紫外-可见分光光度法从开始到现在，经历了一个漫长的、曲折的过程。分光光度法分光光度法的使用始于牛顿(Newton)。早在1665年牛顿做了一个惊人的实验：他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔，在室内形成很细的太阳光束，该光束经棱镜色散后，在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。牛顿通过这个实验，揭示了太阳光是复合光的事实。1814年德国物理学家J.夫琅和费利用自制光谱装置仔细观察太阳光时，在明亮彩色背景上观察到576条狭细的暗线。其中最明显的8条用A到H字

2、母标记。这就是人们最早知道的吸收光谱线，被称为“夫琅和费线”。分光光度法1859年德国物理学家本生(R．W．Bunsen)和基尔霍夫(G．R．Kirchhoff)发现由食盐发出的黄色谱线的波长和“夫琅和费线”中的D线波长完全一致，才知道一种物质所发射光的波长(或频率)，与它所能吸收的波长(或频率)是一致的。分光光度法朗伯(J．H．Lambert)早在1760年就发现物质对光的吸收与物质的厚度成正比，后被人们称之为朗伯定律；比耳(A.Beer)在1852年又发现物质对光的吸收与物质的浓度成正比，后被人们称之为比耳定律。在应用中

3、．人们把朗伯定律和比耳定律结合起来，称之为朗伯—比耳定律。随后，人们开始重视研究物质对光的吸收，并试图在物质的定性、定量分析方面予以使用。因此，许多科学家开始研究以朗伯—比耳定律为理论基础的仪器装置。紫外-可见分光光度计世界上第一台紫外可见分光光度计(不是商品仪器，很不成熟)在1918年美国国家标准局研制成功。世界上第一台成熟的紫外可见分光光度计商品仪器由美国Beckman公司于1945年推出。从此紫外可见分光光度计开始在各个领域得到飞速发展。紫外-可见分光光度计一般的双光束紫外可见分光光度计，大多只有一个单色器。例如，日本

4、岛津公司的UV-2450、UV-2550，北京普析通用公司的TU—1901、TU—1221。但是，目前国际上最高级的紫外可见分光光度计中，大多数都有两个单色器；如美国P-E公司的S50／S90系列。这些最高级的紫外可见分光光度计仪器的单色光的单色性很好、杂散光很小、分析误差很小、自动化程度很高、操作非常简单。但价格昂贵，如果每台仪器的附件全套配齐，则需8万～10万美元。单色器：将光源发出的光分离成所需要的单色光的器件称为单色器内容提要第一篇原理及应用领域第二篇常用测定方法第三篇影响仪器质量的几个重要指标第一篇紫外/可见分光

5、光度计的原理及应用领域紫外-可见分光光度法概述分光光度法：利用分光装置，将光源产生的连续光分成各种单色光，用分光后的单色光去照射待测物质，研究物质对不同波长的吸收强弱，对待测样品进行定性、定量分析的方法。紫外-可见分光光度法概述在分光光度法中，按照波普区域可分为：红外分光光度法（3X103nm_3X104nm）可见分光光度法（400nm-780nm）紫外分光光度法（200nm-400nm）合称紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法概述光的选择吸收当一束光照射到某种物质的固态物或溶液上时，一部分光会被吸收或被反射，不同的物质

6、对于照射它们的光束的吸收程度是不同的，对某个波长的光吸收强烈，对另外波长的光吸收很小或不吸收，我们把这种现象称为光的选择吸收。物质呈现出特征的颜色，就是它们对可见光中某些特定波长的光线选择吸收的缘故。一切物质都会对可见和不可见光中的某些波长的光进行吸收物质颜色和吸收光颜色的关系吸收光物质颜色颜色波长(nm)黄绿紫400~450黄蓝450~480橙绿蓝480~490红蓝绿490~500紫红绿500~560紫黄绿560~580蓝黄580~600绿蓝绿600~650蓝绿红650~750电磁波谱图0.0

7、1nm0.1nm800nm10µm500µm1cm波长200nm400nm2.5µm25µm1m光谱可区域见γ射线χ射线紫外光光红外光微波无线电波分析分光方法χ射线光度核磁共振γ射线光谱法光谱法紫外光谱法法红外光谱法微波光谱法光谱法1m=104µm=106nm=109ǺUV/VIS/NIR光照射到物质上入射光I0透射光I光程长光源透射率T=I0I检测器朗伯定律（1760年）：物质对光的吸收与物质厚度成正比:A=f(b)比耳定律（1852年）：物质对光的吸收与物质浓度成正比:A=f(c)紫外/可见分光光度计的

8、简单原理：LAMBERT-BEER定律此处T:透射率e:摩尔消光系数l:光程长C:浓度吸收A=log=eCl1T当一束平行的单色光通过某一均匀溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的长度的乘积成正比。成立条件：①单色光②稀溶液A=log—=-logT=eCl=abc吸光度、透过率与浓度的关