微生物检验-第十二章-真菌ppt课件.ppt

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1、真菌真菌有细胞壁、典型细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。细胞质内有完整的细胞器。原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较原核细胞型微生物　　　　　　　真核细胞型微生物细胞核结构核膜　　　　　　无　　　　　　　　　　　　　有核仁　　　　　　无　　　　　　　　　　　　　有分裂方式　　　主要以二分裂　　　　有丝分裂，减数分裂细胞质结构质膜　　　　常缺乏固醇　　　　　　　　　常有固醇内膜　　　较简单，有中介体　　复杂，有内质网和高尔基体核糖体　　　　70S80S呼吸系统质膜或中介体　　　　　　　　线粒体Dimorphism（二相性真菌）机体内寄生37℃UnicellularMul

2、ticellular含动物蛋白培养基yeast沙保氏培养基25℃普通培养基25℃mold真菌繁殖结构，一条菌丝可生成多个孢子MorphologyofSpore孢子芽胞作用真菌繁殖结构细菌休眠结构，抵御不良环境低抗力不强，加热60~70℃短时间即可死亡强，有的可耐100℃数小时Categoriesofsporesexualspore:asexualspore分生孢子叶状孢子孢子囊孢子芽生孢子厚膜孢子关节孢子大分生孢子小分生孢子芽生孢子厚膜孢子关节孢子孢子囊孢子标本（1）皮肤的角质性物质（2）各种分泌物和排泄物（3）血液和体液（4）脓汁及渗出物（1）采集的标本要适宜（2）在用药前采集标本（3）

3、采集的标本量要足（4）严格无菌操作（5）采集的标本立即送检注意镜检真菌形态真菌抗原检测真菌分离培养与鉴定真菌核酸检测真菌毒素检测实验室检验癣病标本多用KOH湿片检查法意义③判断某些真菌种的致病性等,如皮肤癣菌、曲霉等。直接镜检阳性表示：①有诊断意义。②看到的就是真菌的形态，可确定某些致病性真菌的属或种。②有假阳性结果。局限性：①阴性结果不能排除真菌感染；常用的染色方法常用的染色方法有革兰染色、瑞氏染色、荧光染色，乳酸酚棉蓝染色、还有墨汁负染色等。对检测骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌，需作瑞氏染色或姬氏染色后镜检。检测病人脑脊液标本中新生隐球菌，需作墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和

4、荚膜不着色（二）、真菌抗原检测白假丝酵母菌甘露聚糖抗原、隐球菌多糖荚膜抗原、组织胞浆菌循环多糖抗原常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射免疫法（三）、真菌的分离培养真菌的培养特点：三低两高真菌培养是目前准确鉴定真菌的可靠方法平皿培养大试管培养玻片培养①菌落性质：酵母菌还是霉菌②菌落大小：病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大④致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂。③菌落颜色病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；菌落的性状是鉴别真菌的重要特征真菌鉴定1.糖(醇)类发酵试验2.同化碳源试验3.同化氮源试验菌种鉴定是一个复杂过程，仅观察菌落形态是远远不

5、够的，还需作生化反应，分子生物学鉴定，必要时将菌种送有关单位鉴定。核酸检测毒素的检测动物试验1.多烯类抗生素，如两性霉素B、制霉菌素、曲古霉素等。2.吡咯类，包括酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、克霉唑、益康唑等。3.其他类如氟胞嘧啶。抗真菌药物分类--化学结构分类临床标本直接检查检测抗原直接镜检固定标本染色墨汁负染色法KOH法毛发指甲皮屑脑脊液分离培养沙氏培养基25℃37℃观察菌落分子生物学检测动物实验检测抗体病理检查镜检、生化反应小结真菌的致病性真菌的基本特性：菌丝、孢子、培养特性标本采集注意事项常用的检查方法：显微镜检查、分离培养、生化实验思考题：1.简述真菌的致病性特点。2.真菌

6、标本采集是有哪些注意事项？3.形态学检查和培养在真菌检查中的意义。（一）掌握毛癣菌属、表皮癣菌属和小孢子丝菌生物学特性、微生物学检验方法及鉴定。（二）熟悉浅部真菌感染的种类目的要求皮下组织感染真菌毛癣菌属表皮癣菌属小孢子菌属表面感染真菌皮肤癣真菌糠秕马拉色菌着色真菌孢子丝菌位置：寄居于人体皮肤和毛干的最表层。因不接触组织细胞，很少引起宿主细胞反应。嗜脂性酵母样菌代表：秕糠马拉色菌(Malasseziafurfur)症状：皮肤表面出现花斑癣（汗斑）微生物检验1．直接显微镜检查可采用透明胶带粘贴取材法，将透明胶带直接贴于皮肤表面，数分钟后揭下，直接贴于载玻片上镜检或经棉蓝染色或革兰染色后镜检。

7、可见孢子和菌丝。孢子为圆形或卵形，厚壁，芽颈较宽，常成簇分布；菌丝粗短，呈腊肠样。2．分离培养与鉴定毛癣菌属毛癣菌属（Trichophyton）属半知菌亚门－丝孢菌目－丛梗孢菌科，有20余种，其中14种能引起人和动物的感染。临床上常见的有红色毛癣菌(trichophytonrubrum)须癣毛癣菌(T.mentagrophytes,又称石膏样毛癣菌)许兰毛癣菌(T.schoenleinii,又称黄癣菌)紫色毛癣菌（T.v