血凝仪的工作原理.ppt

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1、BE血凝仪的工作原理、使用和保养一、血凝仪的工作原理二、血凝仪的应用三、BE血凝仪的使用和保养一、血凝仪的工作原理目前开展的血栓/止血成份检测的主要方法有凝固法、底物显色法、免疫法、乳胶凝集法等。在血栓/止血检验中最常用的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT）、内源凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、蛋白C、蛋白S等均可用凝固法测量。所以目前半自动血凝仪基本上都是以凝固法测量为主，而在全自动血凝仪中也一定有凝固法测量。凝固法中又可分为光学法和磁珠法两类。由于光学法几乎可涵盖各种检测方法，为了降低仪器制造

2、成本，全自动血凝仪以光学法居多。但也有少数高级全自动血凝仪中凝固法测量采用无样品干扰的双磁路磁珠法，而其它测量采用光学法，并可同时进行检测。1.血凝仪的检测原理对第二代的传统的光学原理血凝仪容易受到标本的黄疸、脂血、乳糜血等的影响。对第三代的双磁路磁珠法原理的血凝仪在现今社会血黏度增高的趋势下也非常容易受到标本黏度变化的影响。第四代光电磁原理由此出现。第一代，电流法：即是将待检样品作为电路的一部分，由于纤维蛋白具有导电性，可利用电流的断与否来判断纤维蛋白的形成与否，即判断凝固终点。具体表现为：将两电极插入待检样品，其中一个电极可以上下运动。当两个电极都在血浆中的时候，电路是连

3、通的；当其中一个电极向上运动离开血浆时，电路时断开的。往血浆中加入激活剂，血浆中纤维蛋白形成，此时可运动电极向上运动时，可勾起纤维蛋白丝。由于纤维蛋白丝是导电的，故此电路仍可连通，此时仪器即可将其判为凝固终点。第二代，光学法：光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。根据仪器不同的光学测量原理，又可分为散射比浊法和透射比浊法两类。（1）散射比浊法：根据待检样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90度直角，当向样品中加入凝血激活剂后，随样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光逐步增加，当样品完全凝固以后，散射光的

4、强度不在变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固终点作为100%,把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线。（2）透射比浊法：是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化来确定凝固终点的，与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的比色法一样呈直线安排，来自光源的光线经过处理后变成平行光，透过待测样品后照射到光电管变成电信号，经过放大后监测处理。当向样品中加入凝血激活剂后，开始的吸光度非常弱，随着反应管中纤维蛋白凝血的形成，标本吸光度也逐渐增强，当凝块完全形成后，吸光度趋于恒定。血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线

5、并设定其中某一点对应的时间为凝固时间。第三代，磁珠法：磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来测量凝血功能的。根据仪器对磁珠运动测量原理的不同，又可分为光电探测法和电磁珠探测法。（1）光电探测法：在磁珠法中光电探测器的作用与光学中的不同，它只测量血浆凝固过程中磁珠的运动规律，与血浆的浊度无关。在磁珠法中的一对电磁铁安放在测试杯的两端，它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测试杯中摆动，在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接收装置，在磁珠摆幅衰减到50%时确定凝固终点。（2）电磁探测法：电磁探测法又可称为双磁路磁珠法，其中一对磁路用于吸引磁珠摆动，另一对磁路利用磁珠摆动过程中对磁力线的切割

6、所产生的电信号，对磁珠摆动幅度进行监控，当磁珠摆动幅度衰减到50%确定凝固终点。第四代，光电磁法：综上所述，前三代的检测原理都是终点法，即在检测前设置一个检测的终点，一旦达到检测停止的指标即判断凝血，这受到很多限制，无论是标本还是实验环境的改变都会引起检测的失准。第四代的光电磁原理结合了光学法和磁珠法之优点的第四代原理，测试杯中放有磁珠，测试时，测试杯下面的永久磁铁旋转，带动杯中磁珠沿杯壁旋转。测试杯的侧壁外安装有红外反射式光电器件监视磁珠运动变化。根据运动力学原理当血浆粘度增大后，旋转的磁珠将向杯中心靠拢，光电器件检测不到磁珠时检测结束。光电磁原理是真正意义上的动态法检测，

7、这样避免了：1、传统光学法对于标本颜色改变对于实验的影响，例如:黄疸、脂血、乳糜血；2、传统磁珠法对于标本粘度改变对于实验的影响。现今随着社会发展，人体血液黏度逐渐升高，单纯的磁珠法已经并非往日的金标准。德国BE血凝仪就是应用的光电磁原理：以光学法为基础，磁珠起到了一个信号补偿作用，当血浆粘度增大后，旋转的磁珠向杯中心靠拢，当测试杯侧壁外安装的红外反射式光电器件检测不到磁珠运动变化时表明血浆凝固，即测量结束。2.BE血凝仪的整个反应过程可以分为三个阶段：一、不稳定期：也就是标本和实际进行了混匀之后并未完