信阳职业技术学院0263.ppt

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1、信阳职业技术学院药学与检验系免疫球蛋白教学项目一、细菌血清学鉴定1、掌握免疫球蛋白和抗体的概念Ig的基本结构、功能区及水解片段;Ig的生物学功能;IgG、IgM、IgA的特性和免疫功能。2、熟悉Ig的类型;单克隆抗体的概念、特性及临床应用。3、了解Ig的其他结构、多克隆抗体、基因工程抗体;Ig的抗原特异性。目的要求1.抗体(antibody,Ab):由抗原刺激机体免疫系统产生的,能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。抗体与免疫球蛋白的概念2.Ig(immunoglobulin):具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。因此,抗体都是Ig,但

2、Ig不一定都是抗体。一、基本结构:1.四肽链结构●两条相同的重链(heavychain,H链)●两条相同的轻链(lightchain,L链)第一节免疫球蛋白的结构两条重链各由450-570个氨基酸残基组成,分子量约50-75KD。根据重链氨基酸的组成和排列不同,可将其分为五类:即μ、γ、α、δ、ε链IgM、IgG、IgA、IgD、IgEH链:第一节免疫球蛋白的结构两条相同的轻链各由214个氨基酸残基组成,分子量约25KD。根据轻链氨基酸的组成和排列不同,可将其分为两型:即κ、λ型(κ:λ约为2:1)L链:第一节免疫球蛋白的结构●有两个端氨基

3、端(N端)羧基端(C端)●分两个区可变区(variableregion,V区)恒定区(constantregion,C区)第一节免疫球蛋白的结构2.可变区与恒定区●超变区(hypervariableregion,HVR)可变区中一些特定位置的氨基酸显示更大的变异性故称超变区,又称互补决定区。(complementarity-determiningregion,CDR)●骨架区(frameworkregion,HVR)可变区中变化较小的部分第一节免疫球蛋白的结构抗体的互补决定区与抗原表位结合示意图2.Ig的其他结构●连接链(joiningch

4、ain,J链)是一条富含半胱氨酸的多肽链,由浆细胞合成。作用:连接Ig分子形成二聚体和五聚体。●分泌片(secretorypiece,SP)是一种由粘膜上皮细胞合成和分泌的含糖肽链。作用:保护分泌型IgA免受蛋白酶的水解;介导二聚体IgA的转运和分泌。第一节免疫球蛋白的结构五类免疫球蛋白结构示意图二、免疫球蛋白的功能区第一节免疫球蛋白的结构1.VH·VL—结合抗原的部位2.CH1·CL—遗传标记所在3.CH2—具有补体结合部位4.CH3—与细胞表面Fc受体结合5.铰链区—在CH1和CH2之间,富含脯氨酸,易伸展弯曲,易被蛋白酶水解。第一节免

5、疫球蛋白的结构三、免疫球蛋白的水解片段1.IgG经木瓜酶水解2个抗原结合片段(Fab)(fragmentantigenbinding)1个可结晶片段(Fc)(fragmentcrystallizable)第一节免疫球蛋白的结构IgG木瓜蛋白酶三个片段2.IgG经胃蛋白酶水解F(ab′)2pFc′3.意义:⑴用于研究免疫球蛋白的结构和功能;⑵避免超敏反应。IgG胃蛋白酶两个片段第一节免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的水解片段(一)同种型指同一种属所有个体间的Ig分子共有的抗原特异性。(二)同种异型指同一种属不同个体间的Ig分子具有特异性不同的抗原决

6、定簇。(三)独特型指不同B细胞所产生的Ig分子V区具有的抗原特异性标志。第二节免疫球蛋白的抗原特异性免疫球蛋白的血清型一、特异性结合抗原(VL·VH);二、激活补体抗毒素+外毒素中和毒素抗病毒抗体+病毒阻止病毒感染细胞分泌型IgA+细菌抑制细菌粘附第三节免疫球蛋白的生物学活性三、结合细胞表面的Fc受体1.调理作用(IgG);2.抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(IgG);(antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)3.介导Ⅰ型超敏反应(IgE);第三节免疫球蛋白的生物学活性四、穿过胎盘(I

7、gG)和粘膜(SIgA);抗体的调理作用ADCC作用免疫球蛋白的功能㈠IgG1.特性:②是再次应答的主要Ig,在血清中含量最高,占血清Ig总量的75%~80%;③半寿期最长,约20~23天;④于出生后3个月开始合成,3~5岁达成人水平。①IgG多为单体,分子量约150KD,有四个亚类(IgG1~4);第四节各类免疫球蛋白的特性与功能2.IgG的免疫功能:①IgG是体内抗感染的主要抗体,发挥抗毒素、抗细菌、抗病毒等效应;②IgG是唯一能通过胎盘的Ig,在新生儿抗感染中起重要作用;第四节各类免疫球蛋白的特性与功能③IgG的Fc段可与巨噬细胞、中

8、性粒细胞、NK细胞表面相应受体结合,发挥调理吞噬、ADCC效应。④参与某些自身免疫病及Ⅱ、Ⅲ型超敏反应。㈡IgM:①IgM为五聚体,是分子量最大的Ig(约900KD),称巨球蛋白

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