叶绿素的提取和分离.doc

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1、实验教学方案—叶绿体中色素的提取和分离 实验原理      叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。      层析液（石油醚）是一种脂溶性很强的有机溶剂。根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离，溶解度高的在滤纸上扩散的快，溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素，它随石油醚在滤纸上扩散得最快，叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散得最慢。这样，四种色素就在扩散过程中分离开来。      目的要求      1．学会提取和分离叶绿体中色素的方法和原理。     

2、 2．能分辨叶绿体中的四种色素。      材料用具      新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）。      干燥的定性滤纸，烧杯（ 100    mL），研钵，玻璃漏斗，吸管，剪刀，小试管，药勺，量简（10ml），天平，试管架      丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。      方法步骤      1．提取绿色叶片中的色素     （1）取几片绿色的叶片，去掉叶柄和主脉，用天平称取5g叶片，剪碎，放入研钵中。    （2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，进行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮，倒入研钵中，迅速充分研磨。    （3）将

3、研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管目塞紧。      2．制备滤纸条      取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长  10 cm、宽  1cm的滤纸条，在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。    3．画滤液细线、      用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液于后，再画2~3次。      4．分离叶绿体中的色素    将3 mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微料靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖

4、上烧体；注意，不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。      5．观察实验结果    看到四种色素的颜色后，取出滤纸条，观察滤纸条上的色素带颜色、位置、宽窄，并且填写实验报告。           讨论1. 提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？2. 为什么不能让滤纸上的滤液细线触到层析液？3．为什么实验结束后一定要用肥皂将手洗净？由于接触了丙酮、苯等化学药品。4. 叶绿体中有哪几种色素？滤纸条上的色素带，从上到下是怎样排列的？5. 叶绿体中的色素含量最多和扩散速度最快的是哪一种？