第4章微生物的生长ppt课件.ppt

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1、食品微生物学刘书亮微生物的生长第4章4.1微生物生长的概念4.2微生物生长量的测定4.3微生物的群体生长规律4.4环境因素对微生物生长的影响一个微生物细胞合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。个体的生长原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加个体繁殖,数目的增加群体内各个个体的生长群体的生长个体生长+个体繁殖=群体生长4.1微生物生长的概念单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的增加。微生物生长量：评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果；客观地反映微生物生长的规律；4.2微生物生长量的测定4.2.1测生长量4.2.

2、2计数法4.2.1测生长量直接法测体积测干重1个细菌细胞=10-13~10-12g间接法生理指标法粗蛋白总量=含氮量（%）×6.25含碳量测定其他：磷、DNA、RNA、产酸、产气、CO2、耗氧、产热、粘度等比浊法麦氏比浊法：分光光度计法:麦氏比浊法:(BaSO4)群体生物量比浊法在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内，否则不准确。450---660nm107个/ml4.2.2计数法直接法血球计数板法比例计数法显微镜下直接计数间接法平板菌落计数法液体稀释法膜过滤法（样品含菌量少）倾

3、注法涂布法显微镜直接计数法采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；一个活细胞形成一个单菌落，一般用菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数。实际上：也可出现几个细胞形成一个菌落。倾注法涂布法优点：常用、较准确、可对不同种微生物做活菌计数；缺点：时间长、人为误差大、有机械损伤；2、Themostprobablenumbermethod（液体稀释法）对未知样品进行10倍稀释，然后根

4、据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管，记录每个稀释度出现生长的试管数，根据数学统计，然后查最近似数（MPN）表，可得样品中的活菌含量。3、膜过滤培养法当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器，然后将膜转到相应的培养基上进行培养，对形成的菌落进行统计。如何快速测定呢？TTC（氯化三苯基四氮唑）：菌落微小时成玫瑰红色TTC纸片法测细菌数量；美兰染色还原法：估测牛奶中细菌数量；细菌总数快速测定仪；4.3微生物的群体生长规律4.3.1单细胞微生物的典型生长曲线生长曲线(GrowthCurve)：将纯种单细胞微生物接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量

5、，以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到一条反映其在整个培养期间菌数变化规律的曲线。迟缓期(Lagphase)：将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延滞期、适应期.细胞形态变大或增长，细胞体积最大细胞内RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代谢活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。对外界不良条件敏感。特点迟缓期出现的原因：调整代谢在生产实践中缩短迟缓期的常用手段：(1)利用对数生长期的细胞作为种子；(3)培养基成分(2)适当扩大接种量食品微生物学刘书亮又称指数生长期(Exponentialphase)，在

6、生长曲线中，细胞数以几何级数增长的时期．对数生长期(Logphase)：平衡生长；酶系活跃、代谢旺盛；生长速率常数R最大，代时最短；细胞群体的形态与生理特征最一致；抗不良环境能力最强。研究微生物基本代谢的良好材料。常在生产上用作种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。特点：时间与细胞数量影响微生物代时的因素：1）菌种。不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同2）营养成分。在营养丰富的培养基中生长代时短3）营养物浓度。在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率的营养物，称为生长限制因子。4）温度。在一定范围，生长速率与培养温度呈正相关。稳定生长期(

7、Stationaryphase)：此期细胞重要的分化调节阶段：储存糖原等细胞质内含物；形成芽孢或建立自然感受态；积累代谢产物；某些放线菌抗生素的大量形成；由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步不适宜于细菌生长，导致生长速率降低直至零稳定期又称恒定期或最高生长期，此时培养液中活细菌数最高并维持稳定。生产上为获得更多的菌体或代谢产物1、补充营养物质或取走代谢产物2、调节pH、温度3、对好氧菌增加通气4、搅拌或振荡等措施延长稳定生长期