有机实验报告.doc

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1、糖、氨基酸和蛋白质的鉴定糖一、糖的鉴定糖类化合物:又称碳水化合物,是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,一般由碳、氢与氧三种元素所组成。实验目的:(1)进一步了解糖的化学性质;(2)掌握鉴定糖的方法及其原理。(一)?-萘酚试验(molish)糖类化合物一个比较普遍的定性反应是molish反应。即在浓硫酸存在下,糖与?-萘酚(molish试剂)作用生成紫色环。实验方法取3支试管,编号,分别加入0.5ml0.5%的各待测糖水溶液,滴入2滴molish试剂(?-萘酚的乙醇溶液),摇匀。把试管倾斜450,沿管壁慢慢加入约1ml浓硫酸(切勿摇动),小心竖直后仔细观察两层

2、液面交界处的颜色变化。硫酸在下层,试液在上层样品:葡萄糖、蔗糖及淀粉解释:糖被浓硫酸脱水生成糠醛或糠醛衍生物,后者进一步与?-萘酚缩合生成紫红色物质,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫色环。(二)fehling试验(1)实验原理fehling试剂:含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀,fehling试剂中需加入酒石酸钾钠,它与cu2+形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子。(2)操作方法取4支试管,编号,分别加入fehling

3、试剂i和ii各0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后,分别加入5滴待测糖溶液,振荡后置于沸水浴中加热2~3min,取出冷却,观察颜色变化及有无沉淀析出。fehling试剂i:称取3.5g硫酸铜溶于100ml蒸馏水中,得淡蓝色的fehling试剂i。fehling试剂ii:将17g酒石酸钾钠溶于20ml热水中,然后加入20ml含5gnaoh的水溶液,稀释至100ml得无色透明的fehling试剂ii。样品:葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖解释:硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。(三)benedict试验(1)实验原理:

4、benedict试剂是fehling试剂的改良。benedict试剂利用柠檬酸作为cu2+的络合剂。benedict试剂:取17.3g柠檬酸钠和10g无水碳酸钠溶于80ml水中,再取1.73g结晶的硫酸铜溶解在10ml水中,慢慢将此溶液加入上述溶液,用水稀释至100ml得benedict试剂。(2)操作方法用benedict试剂代替fehling试剂重复以上实验,取4支试管,编号,分别加入benedict试剂0.5ml。摇匀并置于水浴中微热后,分别加入5滴待测糖溶液,振荡后置于沸水浴中加热2~3min,取出冷却,观察颜色变化及有无沉淀析出。样品:葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖

5、解释:硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。(四)成脎试验(1)实验原理:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎,糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎,其晶形、熔点及生成速度大都不同,所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。由于成脎反应是发生在c1和c2上,不涉及糖分子的其他部分,所以葡萄塘、果糖都能生成相同的脎。但由于成脎的速度不同,仍然是可以区别的。(2)操作方法在试管中加人1ml5%的样品溶液,再加入0.5ml10%的苯肼盐酸盐溶液和0.5ml15%的乙酸钠溶液,在沸水浴中加热并振摇,记录并比较形成结晶所需要的时间。

6、并在低倍显微镜下观察脎的结晶形状。样品:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖注意:苯肼有较高毒性。取用时慎勿触及皮肤。若已发生皮肤沾染,先用稀醋酸洗,再用清水洗净。解释:单糖与过量的苯肼作用生成糖脎,糖脎是不溶于水的黄色晶体。不同的糖脎,其晶形、熔点及生成速度大都不同,所以可通过成脎试验区别不同的还原性糖。(五)tollens试验在洗净的试管中加入1mltollens试剂,在加入0.5ml5%糖溶液,在50oc水浴中温热,观察有无银镜生成。样品:葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖解释:(六)淀粉水解试验(1)实验原理:淀粉是葡萄糖的高聚体,在餐饮业又称芡粉,通式是(c6h10o5)n。淀粉

7、在酸的催化作用下,能发生水解;淀粉的水解过程:先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物),糊精继续水解生成麦芽糖(双糖),最终水解产物是葡萄糖(单糖),其与fehling试剂作用可发生显色反应。(2)操作方法:在试管中加入3ml淀粉溶液,再加入0.5ml20%稀硫酸,将试管放在沸水中加热5min,然后取出试管冷却后用10%naoh溶液中和至中性。取2滴与fehling试剂作用,观察有何现象发生?现象:产生砖红色沉淀解释:淀粉是葡萄糖的高聚体,淀粉在酸的催化作用下,能发生水解;淀粉的水解过程:先生成分子量较小的糊精(淀粉不完

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