核酸概述分子生物学ppt课件.ppt

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1、一核酸二核酸的化学成分三核酸的理化性质四DNA的一级结构五DNA的二级结构六DNA的高级结构七基因与基因组第一章核酸概述一核酸*1925-1930年,Levene确定核酸是由4种核苷酸组成;Chargaff发现四种核苷酸并不是简单的1:1的关系。1核酸的发现*1868年,Miescher发现核素,是一类在白细胞中富含磷酸酸性的物质。*1889年,Altmann在酵母中制备了不含蛋白的核素,称之为核酸(Nucleicacid)。*转化实验1928年,Griffith等人肺炎双球菌实验(图1-1);1944

2、年,Avery提出转化因子是DNA(图1-2)。*Blendor实验1952年,Hershey进一步证明DNA是遗传物质(图1-3)。噬菌体模式图2核酸的分类与分布90%以上分布于细胞核,其余分布于核外如线粒体,叶绿体,质粒等。分布于胞核、胞液。(deoxyribonucleicacid,DNA)脱氧核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)核糖核酸携带遗传信息,决定细胞和个体的基因型(genotype)。参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。二核酸的化学成分嘧啶

3、碱基嘌呤碱基*碱基β-D-核糖β-D-2-脱氧核糖*戊糖腺苷(AR)脱氧胞苷(dCR)β1’,N9-糖苷键β1’,N1-糖苷键β1’β1’N9N1β,N糖苷键主要核苷有八种*核苷*核苷酸*核酸5'pApCpTpTpGpApApCpG3'DNA5'pApCpUpUpGpApApCpG3'RNA5'pACTTGAACG3'5'pACUUGAACG3'核酸的简写式:5’→3’5’→3’三核酸的理化性质*溶解性均溶于水不溶于一般有机溶剂,在70%乙醇中形成沉淀*晶形DNA为白色纤维状固体RNA为白色粉末状固体*

4、两性解离呈酸性在中性溶液中带负电荷*沉降速度:RNA>环状DNA>开环、线状DNA*粘度DNA粘度大RNA粘度小*旋光性均很强*密度RNA>双链DNA;环状DNA>开环、线状DNA单链DNA>双链DNA*核酸的紫外吸收碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有强烈的光吸收,λmax=260nm1OD260dsDNA=50μg/ml1OD260ssDNA=33μg/ml1OD260RNA=40μg/ml纯DNAA260/A280=1.8纯RNAA260/A280=2.0*核酸的酸解和碱解DN

5、A和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别RNA的碱解*酶水解核酸水解酶:水解磷酸二酯键。DNA水解酶(DNases):以DNA为底物RNA水解酶(RNases):以RNA为底物的。核酸外切酶:从一端(3′-端或5′-端)开始核酸内切酶:从中间开始四DNA的一级结构1、DNA的一级结构DNA分子中核苷酸的排列顺序,DNA顺序(或序列)DNA分子主要由dAMP、dGMP、dCMP和dTMP四种脱氧核糖核苷酸所组成DNA一级结构模式图1)DNA结构的特点:*DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的。

6、*DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧。*两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对,它的组成有一定的规律。2)DNA分子的多样性*碱基的排列顺序,构成了DNA分子的多样性*100bpDNA分子可能排列方式就是4100*DNA中的碱基排列顺序是DNA分子的重要属性*基因的功能取决于DNA的一级结构五DNA的二级结构1、DNA二级结构特征*Watson和Crick在1953年根据DNA纤维X射线晶体衍射图,提出了DNA为右手双螺旋结构的科学假设。*二级结构是指两条多核

7、苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。*通常情况下,DNA二级结构分为两类:一类是右手螺旋,如A-DNA,B-DNA;一类是左手螺旋,即Z-DNA。2、DNA双螺旋的稳定性氢键疏水作用碱基堆积力离子3、DNA结构的多态性目前已知DNA双螺旋结构可分为A、B、C、D及Z型等数种,除Z型为左手双螺旋外,其余均为右手双螺旋。B型A型D型C型E型92%相对湿度75%相对湿度DNA-RNA杂交分子66%相对湿度碱基对减少1)右手螺旋DNA结构类型和螺旋参数结构类型螺旋(nm)螺旋对称性每个核苷酸残基轴(h)和扭角

8、轴(I)沟的宽度(nm)沟的深度(nm)h(nm)I(度)小沟大沟小沟大沟A2.82110.25632.71.100.270.281.35B3.38100.33836.00.571.170.750.85C3.109.330.33238.60.481.050.790.75D2.4380.30445.00.130.890.58E2.437.50.32548.0Z型:在DNA单链中存在嘌呤与嘧啶(CGCGCG或CACACA)交替排列的顺序时,就会

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