第一章 蛋白质化学ppt课件.ppt

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1、第一章蛋白质什么是蛋白质（Protein）？由20种左右的氨基酸通过肽键相互连接而成的一类具有特定空间构象和生物学活性的高分子化合物蛋白质的生物学意义1、是生物体形态结构的物质基础；2、生物体的新陈代谢所包含的化学反应，几乎都是由酶来催化的；3、参与物质的运输；4、生物的运动；5、生物的防御体系。………………………..总而言之，一切生命活动都离不开蛋白质，蛋白质是生命现象的最基本的物质基础。所有蛋白质都含有C、H、O、N四种元素，大多数蛋白质还含有少量的S，有些蛋白质还含有一些其它元素，如P、Fe、Cu、Mo、I、……..

2、。各种蛋白质的含氮量都很接近，都在16%左右，因此可通过测定生物样品中的含氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质的元素组成1克氮就相当于6.25克蛋白质氨基酸（Aminoacid）氨基酸的通式L-AlanineD-Alanine蛋白质水解得到的氨基酸都是L-型α-氨基酸中性氨基酸氨基酸的结构酸性氨基酸碱性氨基酸芳香族氨基酸杂环氨基酸L-谷氨酸-γ-半醛脯氨酸氨基酸的分类(1)按侧链R基的结构(2)按侧链R基的极性氨基酸的分类氨基酸的一般性质一般能溶于水(胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸除外)；在稀酸、稀碱中溶解性好；一般不溶于有机溶

3、剂（脯氨酸除外）。溶解性：氨基酸的一般性质紫外吸收：Tyr:275-278nmPhe:257-259nmTrp:279-280nm两性解离和等电点氨基酸的形式两性离子形式中性分子形式氨基酸具有酸碱性质，是一类两性电解质Asanacid（protondonor）：Asabase（protonacceptor）：不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在：正离子两性离子负离子氨基酸所带静电荷为“零”时，溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（isoelectricpoint），以pI表示。如何计算氨基酸的等电点？1、R基团不解离的氨基酸

4、pI=(pK1+pK2)/2=(2.34+9.69)/2=6.0K1K2pK1=2.34pK2=9.692、R基团解离的氨基酸K1K2pI=(pK1+pK2)/2pK1=1.88pK2=3.65CH2COOHCH2COOHCH2COO-CH2COO-Asp+Asp+-Asp-Asp--K3pK2=9.60=(1.88+3.65)/2=2.77如何计算氨基酸的等电点？pI=(pK2+pK3)/2=(8.95+10.53)/2=9.74pK1=2.18pK2=8.95Lys++Lys+Lys+-Lys-pK3=10.53K1K

5、2(CH2)4NH3+K3(CH2)4NH3+(CH2)4NH3+(CH2)4NH22、R基团解离的氨基酸如何计算氨基酸的等电点？AminoacidpIAminoacidpIGly5.97Glu3.22Ala6.0Asn5.41Val5.96Gln5.65Leu5.98Lys9.74Ile6.02Arg10.76Ser5.68Phe5.48Thr6.18Tyr5.66Cys5.07Trp5.89Met5.74His7.59Asp2.77Pro6.30各种氨基酸在25℃时pI的近似值氨基酸在电场中移动的行为-+用纸色谱-电泳

6、法分离Glu、Lys和Thr混合液中的三种氨基酸时，如何选择：1、电泳缓冲液的pH值；2、点样位置。（1）与茚三酮的反应氨基酸的化学性质H+RCHO+CO2+NH3蓝紫色物质+=OOO+2OO黄色脯氨酸茚三酮（2）与甲醛的反应氨基酸的化学性质（3）与2，4-二硝基氟苯的反应+O2NNO2NH-CH-COOH+HFRNH2-CH-COOHRFO2NNO2DNFBDNP-氨基酸氨基酸的化学性质1955年Sanger用此法首次阐明胰岛素的氨基酸排列顺序2，4-二硝基氟苯反应的应用多肽或蛋白质+DNFBDNP-多肽或DNP-蛋白质

7、酸水解DNP-氨基酸+氨基酸乙酸乙酯抽提DNP-氨基酸色谱分析鉴定出多肽N-端氨基酸的种类和数目(4)与5一二甲氨基萘-1-磺酰氯（dansylchloride,DNS-Cl）的反应（有强荧光）(5)与苯异硫氰酸（酯）的反应PITCPTC-氨基酸PTH-氨基酸TheEdmandegradation苯异硫氰酸（酯）反应的应用蛋白质自动顺序分析仪就是根据Edman降解法的原理而设计的(6)与亚硝酸的反应应用：1、是VanSlyke氏测定氨基氮的理论基础2、可用来判断蛋白质的水解程度肽（peptide）两个或两个以上的氨基酸通过

8、酰胺键(或称肽键)相连而成的化合物叫作肽。二肽三肽四肽寡肽（oligopeptide）多肽（Polypeptide）十肽肽如何命名？丙氨酰甘氨酰亮氨酸Ala－Gly－Leu(orAla•Gly•Leu)1．谷胱甘肽(glutathione,GSH)2GSHGSSG-2H+2H天然存在的某些活性肽γ-肽键