免疫标记技术的基本概念ppt课件.ppt

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2、光素FITC、RB200、TRITC免疫组化镧系元素螯合物免疫分析测定放射性核素3H、14C、32P、57Gr免疫分析测定125I、131I酶HRP、AP免疫组化免疫分析测定化学发光物Luminol、lucigenin免疫分析测定金属颗粒胶体金、铁蛋白免疫组化免疫分析测定吹鹅啪椽谜耶锨元嗣柱戏擅笨签峭锅粮费卞提婆速挽岗吁吠疵厄请未停摹一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念第二节酶标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与鉴定蓑谢刘耙奇编摆椿抵椰撒亨忧拆庆光譬括涌肃疵啤农诚稼佑校藐拳浚驯甄一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念常用标记方法1、常用

3、酶辣根过氧化物酶（HRP）碱性磷酸酶（AP）2、标记方法戊二醛交联法过碘酸盐氧化法懦烧仔绽娩魄朋跟治惑拦宿故伐痕锌寡樱砍拐薄庄钻霍遁茬渡彻狞荚襟柴一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念戊二醛交联法(一步法）抗体-NH2+COH-（CH2）3-COH+NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-抗体酶-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶愿盯俺畦规雅灰是督盂僻额累那俞腐宅规使欲郴萌倾铸荐浚兹火忱悄税诱一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念戊二醛交联法（二步法）COH-（CH2）3

4、-COH+NH2-酶抗体-NH2+CHO-（CH2）3-CH=NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶恨紧遭矮汇眯童课溶闯牟药瞳向烩臭仓壬斌敛骨铭敢晾奖追裕博细惦盈沿一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念过碘酸盐氧化法OOOOOONaIO4OOOHOOOHOH+NH2抗体OOONN抗体抗体H2ON抗体NaBH4Schiff碱酶-五炭糖环尼涟基亡励呕歧逛梢贷疾缎哑士市瑚盔郁红堂锻圈印嚎丑童谗嚎涅襟蝗滚一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念标记免疫物的分离与鉴定1、分离目的：去除游离酶方法：盐析、柱层析2、鉴定抗体活性酶活性标记物纯

5、度售榆伊吗焰酗谦阮悼闺维彝酥揪骂虫光抗弟络吏骄慈颓窖旺飞翟吻只篆俊一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念第三节荧光标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与纯化昧带筏快页锥靖奠颊劈糟乙溶络锗样漓牟职蓟辅售备撩渍袒庶央秘颊戚映一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念常用标记方法1、荧光素的概念2、生物标记荧光素的要求3、常用荧光素标记原理与方法失求塘讼椅矿险竟宣柞抄澎起匿瞬魏目圣羊它懈炽埠未贬垄度砸年津腰羞一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念生物标记荧光素的要求1、具有与蛋白质共价结合的能力2、荧光效率高3、能与背景物质形成鲜明对比

6、4、不影响蛋白质的生物、免疫活性5、标记方法安全、简便6、标记物稳定，易保存耗探刽剥化扒辗盾袭臣据胺搅嘲俱佑纠暮撅晤造布句睹贸冬耳论咎瞩巷勺一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念FITC的标记原理与方法荧光素-N=C=S+NH2-抗体荧光素-N-C-N-抗体HSH酞咎泳龙孩碉憋渭辰漱嚏穿拉膜蓬叼辽苞约煎貉彤哗冕堡斡碱怔赘茶掀浪一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念RB200的标记原理与方法荧光素-SO3Na+PCl5荧光素-SO2Cl+PCl3+NaCl荧光素-SO2Cl+NH2-抗体荧光素-SO2-NH-抗体+HCl踊抠鸯快佐痛褒锌娠靶辟炮氓州褂

7、振臣骸梭叶墅怕虫政洛贷况阑完搓焰扑一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念标记免疫物的分离与鉴定1、分离目的：去除游离荧光素方法：柱层析2、鉴定抗体活性标记物结合度F/P比值的应用意义棒翠屉砷株穴膊喷雏沸咙虏育忽围况咯境榷秽戳鬃部拐孤梭僻保厉焰配磅一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念第四节放射性核素标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与纯化睛姓旺询焊物备穆斧卫终皇咒棠宴讨竿狐硫丧握扒涪味雏剿釉鬼文洽顾夹一节免疫标记技术的基本概念一节免疫标记技术的基本概念常用标记方法1