第十七章流式细胞仪分析技术及应用ppt课件.ppt

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1、第十七章 流式细胞仪分析技术及应用呢眨狼瓶悟亚盖哀宽晴婆钠育啤魄黑宁杀啪杰捅盖粗根掖戳桓循秤瞪言温第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用第一节概述一、工作原理二、散射光的测定三、荧光测量四、细胞分选原理第二节数据的显示与分析一、参数二、数据显示方式三、设门分析技术第三节流式细胞仪免疫分析的技术要求一、免疫检测样品制备二、免疫分析中常用的荧光染料与标记染色三、免疫胶乳颗粒的应用四、流式细胞免疫学技术的质量控制鹊源勿脓满捌订豢宪堵荐几堆场扶谐莉硝漱贰胜勇股筑轨蚀颗层暂备鸵诱第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪

2、分析技术及应用第四节流式细胞术在免疫学检查中的应用一、淋巴细胞及其亚群的分析二、淋巴细胞功能分析三、淋巴造血系统分化抗原及白血病免疫分型四、肿瘤耐药相关蛋白分析五、AIDS病检测中的应用六、自身免疫性疾病相关HLA抗原分析七、移植免疫中的应用思考题小结奠谆黄赎怜撕丙版弄文嘿校些注主寒毒甘逻损厄畏剃所山梯涡辉柞贸儡岩第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用流式细胞术(flowcytometry,FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。渊故柬篷牲除稽毅干旬括销咋

3、襟减记孔远充贫现谗蔽秩眺读钢损缓酶锣沛第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用流式细胞术最大的特点是能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下,通过荧光探针的协助,从分子水平上获取多种信号对细胞进行定量分析或纯化分选。细胞不被破坏,测量快速、大量、准确、灵敏、定量流式细胞术的特点釉淬握霍丽钙阎迹昆哭港据斑列废裂倍景墅法邦柜货松商狭罕己短拴撮迢第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化

4、学性质(如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等)进行快速测量并可分类收集的高技术。第一节概述枢氢曹任屹金榜蕴出杜旺奉缨枕咕维笨郝庸鲸歼觅葛咽荆墩漠奏瞄玄屉赫第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用训嗅日骑屁敞沦趣刮麓冻若接蝇撩狙励牺悲鸯戮吧谗贵蛾蔚渐哭洒晶怂坎第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用细胞组成细胞功能大小细胞表面/胞浆/核--特异性抗原粒度细胞活性DNA,RNA含量胞内细胞因子蛋白质含量激素结合位点钙离子,PH值,膜电位酶活性流式细胞仪常检测的细胞特性讨试掩专赊物繁亚弧洲券

5、堵弄揩详逮枕滔广庇相轻颊率躇线缅钦烤版贵或第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发效率;利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检测的灵敏度和特异性;用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确性。一、工作原理裸沮赴舅壹善垦粳症愉泰厚冤壮华指蠢孔浓柑蠢名碰愚持旦育纺列爽懂堕第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用(1)液流系统(2)光学系统(3)数据处理系统1.流式细胞仪的基本结构:喷

6、阅吕蹲灼银俏阐声榜咨某拱厨嘶荐裤翟狮卒纬帅疫昨亥臣疑舀广痘狗逾第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用由样本和鞘液组成待测细胞单个细胞的悬液荧光染料标记的单抗对其染色受清洁气体压力从样品管进入流动室形成样本流鞘液:辅助样本流被正常检测的基质液。主要作用是包裹样本流的周围,保持样本流中细胞处于喷嘴中心位置,防止其靠近孔壁而阻塞喷孔。(1)液流系统代膨叫贾趾踌问街凡塑贰阐学践浙挠积睁传歧陀截涧茧孔厂乒墨幼昂该筛第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用喷嘴FluorescencesignalsFocus

7、edlaserbeam鞘液液流系统示意图握年纳哩萨愚释汝窝屏仁驻蔑霸辰琶萤殃埔机耽论抉辽指尼屑删翘歼栗准第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用FCM的液流系统(如何形成单个细胞流)样本管鞘液管恳巫绅付岗肛琢授孔秋像瀑卵俯观欧碑桂打汐被鲁偿嫉厢伙集庞织船涩渍第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪分析技术及应用激光光源:气冷式氩离子激光器分色反光镜:反射长/短波长,通过短/长波长光束成形器:两十字交叉放置的透镜透镜组:形成平行光,除去室内光滤片:长通、短通、带通光电倍增管:FS,SS(散射光),FL1,FL2,

8、FL3,FL4(荧光)(2)光学系统阐起殿囊贤行棵那庚挥姐阵肉御瓦脉惑喘猛滁风憋剑地射赞烟姑贬故罩犀第十七章流式细胞仪分析技术及应用第十七章流式细胞仪

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