2011~2012仪器分析实验09生技(6个)教案.doc

《2011~2012仪器分析实验09生技(6个)教案.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、仪器分析实验教案2011~2012学年第一学期实验一、二气相色谱分析实验一、实验目的1.一般了解气相色谱仪的用法和操作要点。；2.初步学习利用气相色谱法进行定性和定量分析。二、实验原理在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留值、保留时间、保留体积、保留指数及相对保留值等保留参数。因此，在相同的色谱条件下，通过比较已知纯样和未知物的保留参数，即可确定未知物为何种物质。在一定色谱条件下，组分的质量或其在流动相中的浓度，与检测器的响应讯号峰面积或峰高成正比。三、仪器与试剂1．仪器GC9800型色谱仪微量注射器2

2、．试剂苯；甲苯；乙苯；正庚烷(若无G.C，A.R亦可)四、实验内容：(一)苯、甲苯、乙苯、正庚烷混合液的气相色谱分析1.参考条件固定相15%邻苯二甲酸二壬酯；101酸洗白色担体60-80目柱长2m检测器热导池载气H220-30ml/min柱温(t)80-100℃桥流150mA气化室温度120℃纸速10mm/min2.定性分析用标准样品进样对照.分别将苯、甲苯、乙苯、正庚烷适量注入色谱仪，记下保留时间。再将混合试样注入色谱仪，记下各组分的保留时间。将各组分的保留值与纯祖分的保留值进行对照，如某一组分与标准样品的

3、保留值相同，二者即有可能为同一物质，严格说来，则需用双柱定性较为可靠。实验步骤：1)开载气打开气源（按相应的检测器所需气体,如用FID则开氮气，如用TCD则用H2作为载气）。2)开机打开GC9800电源开关。3)调节温度：柱箱90℃；气化室120℃；检测器(检2）200℃；按“柱箱”、“90”、“输入”则设置温度，其它以此类推，按“显示”可察看实际温度。4)升温按“输入”、“运行”两键即可。5)点火将氢气压力调到大于0.08MPa,空气在0.04MPa左右，点好后将氢气调小到0.04MPa左右。6)进样当各部

4、位温度、压力稳定时按照实验内容使用微量进样器进样。7)熄火实验完成后关闭氢气、空气阀。8)退温按“输入”、“退出”两键即可降温。9)关机当各部位温度降至室温方可关机。10）关载气关闭氮气阀门。3.定量分析(1)相对校正因子的计算准确称取苯、正庚烷、甲苯质量，以乙苯为溶剂混匀，取适量注入色谱仪，由各峰求得峰面积后，由下式计算甲苯、正庚烷的相对校正因子。(本实验选取苯为标准物质，设苯的相对校正因子f’0=1)。f1m1/A1f’1=———=————f0m0/A0式中：m1，m0分别为组分重量与标准物的重量A1，A

5、0分别为组分峰面积与标准物的峰面积(2)用内标法定量选择苯作为内标物，要求内标峰与被测峰较靠近，且峰形相似，彼此能较好的分离。准确称取一定量的内标物苯、正庚烷、甲苯、乙苯混合液，混匀后重复进样二、三次，分别测出内标物和待测组分的峰面积，按下式计算各组分的含量A1×m0C1%=————×f’1×100%A0×m式中：m0，m分别为内标物和混合试样的重量A0，A1分别为内标物和待测组分的峰面积五、注意事项：1．当检测器温度大于100℃时方可点火，以防冷凝水在检测头处产生；2．温度调节好后可连续按“显示”键观察各部

6、位实际温度；3．点火时可用一铁片放在点火出口，如有水气则表明火以被点着，然后必须关小氢气流量；4．进样前调基线，数据处理机上按“绘图”键，然后调“灵敏”旋钮调大小，将墨盒移至左边出来一点，调好后按“复位”键；5．取样时微量进样器需反复清洗数次，进样时双手扶正以防针头弯曲。实验三乙酸的电位滴定分析及其离解常数的测定一、实验目的1.通过弱酸溶液离解常数的测定，正确掌握电位法测定溶液的pH值；2.了解用pH计测离解常数的方法和原理。二、实验原理1．pH值的测定当一个氢离子指示电极和一个参比电极共同浸在被测溶液中，构

7、成一电池，两电极产生的电动势与溶液的pH值有关，参比电极底电位保持恒定，而指示电极的电位则随溶液的pH值而改变，因此根据测得的电动势(电池两极的电位差)就可以计算出溶液的pH值。常用的pH指示电极为玻璃电极，最常用的参比电极为甘汞电极。在具体测定pH值时，如用饱和甘汞电极作参比电极，玻璃电极作指示电极，浸入待测溶液中组成的工作电池可如下表示：Ag∣AgCl，HCl(0.1N)∣玻璃膜∣试液‖KCl(饱和)，Hg2Cl2∣HgΔψNΔψL←--------玻璃电极-------------→←-------SC

8、E--------→上述原电池的电动势应为：E=ψSCE-(ψAgCl/Ag+ΔψN)+Δψ不对称+ΔψL2.303RT=ψSCE-ψAgCl/Ag+Δψ不对称+ΔψL-K+—————pH试F令ψSCE-ψAgCl/Ag+Δψ不对称+ΔψL-K=K’2.303RT得E=K’+—————pH试F上式为电位法测定pH的依据。2．PK值的近似测量法HA=H++A-[H+][A-]—————=pKa[HA]