资源描述：
《红花油实验构思.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、红花油相关实验研究草稿（整理）导师让整理个方案朋友们给些意见哈实验思路1、黄酮含量的测定回归方程y=7.33x+0.055r=0.998分为冷、热、索氏提取`x测定值冷1.2931.2681.1591.2400.0731.24热1.3471.2611.371.3280.0591.33索氏提取1.1411.2541.0741.1570.0911.162、多酚含量的测定3、甾醇含量的测定硫磷铁法测总甾醇含量采用硫磷铁法检测红花油中总甾醇含量2.5mol/LKOH乙醇溶液的配制将14.0g氢氧化钾溶解在10mL水中冷却至室温后用乙醇稀释至100mL标准胆固醇对照溶液的配制用
2、乙醇配制成0,75,100,125,150,175mg/L等6个不同质量浓度的胆固醇溶液磷硫铁显色剂的配制精密称取2.5g三氯化铁溶于85%磷酸并用浓磷酸定容至100mL储存于棕色瓶中即为铁储存液冷藏可长期储存,取上述铁储存液1.5mL于棕色瓶中用浓硫酸定容至10mL室温下可储存6~8周.分别向上述6个标准胆固醇溶液加入磷硫铁显色剂2mL摇匀冷却至室温在480nm处测定吸光值得标准曲线取4mL甾醇样品B于试管加入磷硫铁显色剂2mL摇匀冷却至室温在480nm处测吸光值计算其中甾醇的含量试验进行3次重复.2GC-MS法(1).样品制备:称取0.1g的红花油油于试管中,加入
3、1ml1M乙醇-氢氧化钠溶液,密封,摇晃20s,70°C下60min,每10min晃动一下,冷却至室温,然后加入1ml纯水,5ml正己烷,密封,大力摇晃3min,然后分离清液层(正己烷层),水层用5ml正己烷分离3次,收集正己烷溶液,加入1g的无水硫酸钠,旋蒸浓缩,得到样品.(2).GC-MS:180°C15°C/min280°C25min,样品入口温度为250°C，探测器温度为280°C.进样量1μl，氮气流量为1ml/min.离子源:EI源;电子能量:70ev;分子量扫描范围:40-550amu。红花油处理工艺毛油→预处理→脱胶→脱色→脱酸→脱色→脱臭→成品油沉淀
4、物为粗磷脂油脚毛油→真空抽滤→预热80℃→加水/7％盐水→搅拌（保温）→（保温）离心→上清液即脱胶油可采用活性白土和活性炭进行脱色，脱色后的脱色油以正己烷作参比采用真空蒸汽脱臭法真空蒸汽脱臭法是在脱臭锅内用过热蒸汽（真空条件下）将油内呈味物质除去的工艺过程。脱胶：称取毛油200g置于500mL的烧杯中，将搅拌器的搅拌翅放进油中（搅拌器浸入油中2/3处）待油样升温至60~65℃，适当调快搅拌速度，用滴管缓慢加入油重0.1%磷酸和3%蒸馏水，搅拌25min脱胶，于3500r/min离心20min分离出脱胶油.将脱胶油转移到三口烧瓶中，放入磁力转子，在真空度0.09MPa1
5、05条件下脱水，直到油面上看不到水汽为止。抗氧化试验1红花油用7:3的氯仿和甲醇稀释至一定倍数，1%、5%、10%、15%、20%。2用蒸馏水配制7mmol/L的ABTS溶液和140mmol/L的过硫酸钾溶液,分别取20mLABTS溶液和352μL过硫酸钾溶液混合,在室温下暗处静置12~16h后,用无水乙醇将混合液稀释至OD734=0.700+_0.020时得到ABTS+自由基工作液,标准溶液的配制:用无水乙醇配制Trolox溶液浓度分别为20,40,60,80,100,120μmol/L.3取新制备的ABTS+工作液3mL，分别与不同浓度的油或Trolox样品1mL
6、混匀，在室温下反应30min后，测定OD734，以不加油样的试样为空白，按下列公式计算样品对ABTS+自由基的清除率：ABTS+清除率=（1-A样品/A空白）*100以Trolox浓度为横坐标，不同浓度的Trolox对ABTS+的清除率为纵坐标，绘制标准曲线通过计算得到的瓜蒌籽油样品液的清除率，在标准曲线上找出其相对应的Trolox浓度，换算成Trolox当量浓度（mol/L），即TEAC（Troloxequivalentantioxidantcapacity）值羟基自由基清除率的测定测定方法采用Fenton反应，1mL0.75mmol/L的邻二氮菲溶液（无水乙醇配制
7、），加2mL0.2mmol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.4），充分混匀后加入1mL0.75mmol/L的硫酸亚铁溶液（去离子水配制），每加一管立即混匀，加入1mL浓度为0.10.20.40.60.81.0mg/mL的样品溶液，最后加入1mL0.01%H2O2，于37℃保温1h，536nm处测定吸光度为A处理，将体系中的样品改为加入1mL蒸馏水，测定得A对照。空白对照不加0.01%H2O2，以蒸馏水补充体积，测定得A空白对照每个质量浓度样品做3个平行样品，取平均值羟基自由基的清除率计算公式如下：清除率（%）=（A536处理-A536对照）/（A536空白
