实验二 Feulgen反应显示DNAppt课件.ppt

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1、安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等实验二Feulgen反应显示DNA安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等一、实验目的1.了解DNA染色的多种方法、原理和应用。2.掌握Feulgen反应的原理及操作步骤。3.观察细胞中DNA的分布，巩固所学的理论知识。4.了解实验中设计对照组的重要性。5.熟练掌握移液器的使用方法。安防系统指以搭建安全防范管理

2、平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等二、实验原理对DNA分析可分为定性和定量两种方式。定性分析：对事物进行质的判断和把握其基本特征的一种思维方法和研究途径。定量分析：是依据统计数据，建立数学模型，并用数学模型计算出分析对象的各项指标及其数值的一种方法。安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等DNA定性分析1.经典的Feulgen反应2.组织切片细胞核的苏木精染色3.荧光染色

3、（荧光探针PI、DAPI、EB、Hoechst33342、33258等）安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等1.经典的Feulgen反应DNA单链的模式结构DNA双螺旋的模式结构安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等DNA在酸性条件下水解安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技

4、术、网络安全技术等DNA经酸（1mol/LHCl）水解后，分子中的嘌呤和脱氧核糖连接的配糖键被打开，脱氧核糖的一端释放出游离的醛基，并在原位与Schiff试剂反应形成特异性的紫红色产物。安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸钠/钾作用，形成无色的品红液。无色品红与醛基结合则形成紫红色的化合物，这是因为反应产物的分子内含有发色基团醌基所引起的。安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线

5、技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等2.组织切片细胞核的苏木精染色细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA），DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而染色。苏木精在碱性染料中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等人肺组织的苏木精-伊红染色安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技

6、术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等3.荧光染色DAPI、PI、EBPI，碘化丙锭，可嵌入到DNA碱基对中并与之结合，对碱基无特异性选择,最大吸收光谱是493nm，最大发射光谱是630nm，呈红色荧光。DAPI与溴化乙锭（EB）类似：与DNA双螺旋的凹槽部分可以发生相互作用，从而与DNA的双链紧密结合。结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激发波长是356nm。安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术

7、、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等PI染色显示细胞核呈DAPI染色示细胞核亮红色荧光呈蓝色荧光安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等Hoechst33258和33342均为非嵌入性荧光染料。它们在活细胞DNA的AT序列富集区域的小沟处与DNA结合，从而使细胞核着色。Hoechst33342和Hoechst33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微

8、镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光。Hoechst33258染色示胶质瘤细胞核呈亮蓝色荧光安防系统指以搭建安全防范管理平台为目的，利用综合布线技术、通信技术、网络互联技术、多媒体应用技术、安全防范技术、网络安全技术等•DNA定量分析定量细胞术（quantitativecytometry)是定量分析单个组织或细胞、