实验专题生物组织可溶性还原糖脂肪和蛋白质的鉴定ppt课件.ppt

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1、实验专题实验一、生物组织可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定1、实验原理:可溶性糖中的还原糖+斐林试剂砖红色Cu2O沉淀苏丹Ⅲ对脂肪染色显微镜下看到染色细胞呈橘黄色蛋白质中多肽键+双缩脲试剂紫色络合物2、实验材料与实验试剂(1)可溶性还原糖的鉴定材料:含糖量高的生物组织(要求色浅,颜色反应明显)试剂斐林试剂:A液:0.1g/mlNaOH;B液:0.05g/mlCuSO4班氏试剂:A液:CuSO4B液:柠檬酸钠和碳酸溶液某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。(2)脂肪的鉴定材料:富含脂肪的花生种子(提前浸泡3-4d)试剂:苏丹Ⅲ干粉0.1g,

2、95%酒精100ml(3)蛋白质的鉴定材料:富含蛋白质的大豆或蛋清,(蛋清要稀释)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mlNaOH;B液:0.1g/mlCuSO4)双缩脲反应:HNOC-NH-CONH+Cu+→紫色或紫红色络合物(碱性环境)3、实验方法及步骤(1)可溶性还原糖的鉴定制备组织样液→鉴定样液→(取2ml样液于试管→取2ml斐林试剂放入试管中→水浴煮沸2min→观察(淡兰色→棕色→砖色))(2)脂肪的鉴定制作切片→(D染液→吸水纸吸去染液→酒精洗去浮色→吸去多余酒精→滴加1-2滴蒸馏水→盖片)(3)蛋白质的鉴定→镜检(橘黄色小颗粒)制备样液→2ml双缩

3、脲试剂A液→(红紫色)另取2ml样液加2mlI水,颜色无变化染色鉴定(2ml样液→滴B液3-4D摇匀观察)(对照)4、注意事项(1)注意选材(2)注意观察颜色变化并作好记录(3)斐林试剂要现配现用,加热要均匀(4)切片要薄(显微化学鉴定)(5)蛋白质鉴定时,若用蛋清,则要稀释;样液要留出一份作对照。实验二、高倍镜的使用和观察叶绿体1、实验原理叶绿体呈扁平的椭球形或球形,绿色;随细胞质不断流动;可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。2、实验材料(要求取材方便,制片简单,观察效果好)菠菜的叶肉,水松叶或藓类叶等(撕下表皮、稍带叶肉)3、实验方法与步骤(1)制片:撕取

4、表皮稍带叶肉制成临时装片(2)观察:先低倍镜,后高倍镜实验三、观察细胞质的流动1、实验原理:活细胞的细胞质处于不断流动的状态2、实验材料:黑藻幼嫩叶片(叶片扁平、薄;有叶绿体,易观察)细胞质流动的意义:有利于细胞内物质的运输细胞器的移动,能够为细胞内的新陈代谢提供所需物质及合适的环境同时细胞质流动受细胞的代谢状况和外界环境因素的影响;如适宜的光照、温度、pH值、生长素等,都可以促进细胞质的流动,反之不利的环境变化和某些化学药品如麻醉剂等则可以抑制细胞质的流动。3、实验方法与步骤制片→观察(参照物、流速、流向)(叶脉部位细胞水分供应充足)实验四、观察植物细胞的有

5、丝分裂1、实验原理有丝分裂是一个连续动态的变化过程,但可以通过它的形态变化,特别是细胞核中的染色体行为,人为地划分阶段并进行比较研究。植物的分生组织细胞,能够通过有丝分裂增殖2、实验步骤及方法(1)试剂配制0.01g/ml的龙胆紫(1g龙胆紫,100ml蒸馏水)0.01g/ml醋酸洋红(1g洋红,100ml冰醋酸煮沸30S,冷却后过滤)(2)洋葱根尖的培养实验前3-4天,取洋葱一个,放入一盛满水的广口瓶上使洋葱底部接触到水平面,注意常换水,待洋葱长到1-5cm时,取材进行实验。(3)装片制作解离→漂洗→染色→制片→观察(4)注意事项根尖培养要常换水且温度要适宜

6、,取材时间要注意,解离时间要适宜,漂洗充分,染色时间要把握好,制片时根尖要弄碎并要压片实验五、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率1、实验原理:氯化铁溶液中的Fe3是一种无机催化剂,其中的Fe3+可以催化过氧化氢分解成水和氧;新鲜肝脏中含有过氧化氢酶,和Fe3+一样,也能催化过氧化氢分解成水和氧,但二者效率不一样。2、实验材料:新鲜肝脏的研磨液3、试剂与仪器(3%三的过氧化氢溶液和3.5的氯化铁溶液等)4、实验方法与步骤(1)取两支洁净的试管,编号,并且各注入2ml过氧化氢溶液(2)向1号试管内滴入2滴肝脏研磨液;向2号对试管内滴入2滴氯化铁溶液(3)堵住试管口

7、,轻轻地振荡两支试管,使试管内的物质混合均匀。仔细观察并记录哪支试管产生的气泡多(4)将点燃但无火焰的卫生香分别放入1、2试管内液面的上方,观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。(5)注意事项肝脏要新鲜,并要研磨;滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管;要特别注意比较;过氧化氢有腐蚀性;实验时将点燃的卫生香插入试管处,不要插入太深。(6)实验结果与讨论两支试管均有气泡产生,但1号试管产生得快而且多,两支卫生香均燃烧,但1号试管口的更猛烈。通过以上的一组对比实验可以证明酶的高效性。(7)实验思路拓宽a、实验目的:通过增加酶的稀释度来说明酶作用的高效性。b、实验原理:

8、酶是生物催化剂,催化新陈代谢的许多化学

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