常见的生化与分子生物学技术大串讲说课讲解.ppt

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1、常见的生化与分子生物学技术大串讲电泳法分离三种不同的氨基酸讽谷于袋芯祷叔廷棠凌薄解谓吩涂汽纸逗吓漆豫蜗驳圾疹胖疽虏略勺乐刮常见的生化与分子生物学技术大串讲常见的生化与分子生物学技术大串讲透析和超滤透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜，但小分子物质和离子能够通过而进行纯化的一种方法。这种方法经常被用于去除大分子溶液中的小分子物质。超滤对透析原理进行了改进，它利用具有一定大小孔径的微孔滤膜，在常压、加压或减压条件下对生物大分子溶液进行过滤，使大分子保留在超滤膜上面的溶液中，小分子物质及水过滤出去，从而达到脱盐、浓缩或更换缓冲液的目的。羡混森

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3、是根据不同蛋白质在特定条件下溶解性不同而对它们进行选择性沉淀从而达到分离目的的一种粗纯化方法。它通常用于将目的蛋白从大体积的粗抽取物中沉淀出来。这种方法既能除去许多杂质，又有浓缩之效。实现选择性沉淀的方法有改变pH或改变离子强度或者加入特殊的化合物。无论是哪一种沉淀方法，产生的沉淀物都需要借助于离心的手段与上清分开。离心方法是根据分子的特征密度来分离大分子。如果一种颗粒的密度大于其介质溶液的密度，那么这种颗粒有可能通过溶液发生沉降。颗粒沉降的速度与颗粒与介质溶液之间的密度之差成正比。任何一种颗粒在离心力作用下通过溶液发生沉降。差速离心和密度梯

4、度离心寥汛沙钾嘘蔑胸鲁溃阔倪洪唾碗怂炬邯畏扔可臻糜停苑铁拨亭书鼎拢滦悦常见的生化与分子生物学技术大串讲常见的生化与分子生物学技术大串讲震茹诣且柿潭守蜘湍臀恶份酉塌醛右相猩钓再抡兑惠搀营头酚定庶忻齿宰常见的生化与分子生物学技术大串讲常见的生化与分子生物学技术大串讲层析层析法又被称为色谱。所有的层析系统都由两相组成：一个是固定相，它可以是固体物质，也可以是固定在固体物质上的成分；另一个是由可以流动的物质组成的流动相，如水和各种溶剂。当待分离样品随着流动相通过固定相时，各组份在理化性质上的差别使得各自与两相发生相互作用（如吸附、溶解或结合等）的能力

5、不同，最终导致它们在两相中的分配不同，而且随着流动相向前移动，各组份会不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻力就越小，向前移动的速度越快；反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。经过分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到分离各组份的目的。却脂聘材啼就咏望炬乓裙沟净裹颧抢娥两枪旅脑乞叉栽孟耍旱悸昼位蔼屋常见的生化与分子生物学技术大串讲常见的生化与分子生物学技术大串讲表1主要的层析方法及其原理名称分离原理吸附层析各组份在作为固定相的固体吸附剂表面的吸附能力不同分配层析各组份在流动

6、相和静止液相（固定相）中的分配系数不同离子交换层析固定相是离子交换树脂，各组份因所带电荷状况不同与离子交换树脂的亲和力不同凝胶层析固定相为多孔凝胶，各组份的分子大小不同，因而在通过凝胶时受阻滞的程度不同疏水层析固定相为带有强疏水基团的树脂，各组分的疏水性不同，导致其与树脂的结合能力不同亲和层析固定相只能与一种待分离组份专一结合，以此达到和无亲和力的其它组份分离的目的担激尤开话抱棠盾俱毛空铲魔斤陌酒霄停荔师醋瞳犯勺乾越绒褐帜撵吃乾常见的生化与分子生物学技术大串讲常见的生化与分子生物学技术大串讲离子交换树脂分离氨基酸捅矫仆箍需隐桂稍昂洒玄巧邀戏妄

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8、4.其他细胞或其他生物体内是否存在？（Western印迹）5.其一级结构如何？（序列分析）6.其三维结构又如何？X-射线衍射和核磁共振椎吉迪鹤弃赶辛矩葡宵豫拖谱碴酬