AYLS7340克雷伯菌属检验标准操作规程.doc

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1、编写者：沈继录审核者：批准人：生效日期：2012.1.1文件发放范围：微生物组文件年度审核审核者：审核者：审核者：审核者：日期：日期：日期：日期：克雷伯菌属检验标准操作规程1．概述克雷伯菌属包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、鼻硬结克雷伯菌和臭鼻克雷伯菌4个种。临床以肺炎克雷伯菌最为常见。2．标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。3．鉴定3.1形态与染色革兰阴性粗短杆菌。3.2培养特性在血琼脂平板上35℃培养18～24小时呈灰白色、不溶血的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成大而隆起、黏液样、易融合的、粉红色菌落，用接种环挑取呈丝状粘连。3.3生化反应氧化酶试验

2、阴性，发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖等多种糖类，TSI为A／A，IMViC--++，硝酸盐还原、脲酶和赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力、H₂S、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阴性。3.4鉴别要点3.4.1菌属特征琼脂平板上菌落较大、隆起、黏液样，用接种环挑取呈丝状粘连，发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC--++，脲酶、赖氨酸脱羧酶试验阳性，动力试验阴性。3.4.2克雷伯菌属的种间鉴别见．表5—36．表5—36克雷伯菌属种间鉴别的关键性试验(阳性％)菌名吲哚VP枸橼酸盐脲酶赖氨酸丙二酸盐乳糖肺炎克雷伯菌0989895989398产酸克雷伯菌999595909998100鼻硬结

3、克雷伯菌00000950臭鼻克雷伯菌003010403303.5操作步骤3.5.1氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。3.5.2鉴定从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4．药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5．质量控制见《质量管理程序》。6.检验结果解释与分析肺炎克雷伯菌可产生ESBLs，据国内文献报道产酶率在30%以上，产酶株对青霉素、头孢菌素及单酰胺类抗生素均产生耐药。如果检出产ESBLs肺炎克雷伯菌，即使体外药敏试验对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告该菌对所有青

4、霉素类、头孢菌素或氨曲南耐药。但其对头霉素、部分加酶抑制剂的复合抗菌药和碳青霉烯类抗菌药敏感。7.临床意义肺炎克雷伯菌是人类呼吸道的常居菌，在人和动物肠道内也常见，是一种条件致病菌。在临床分离到克雷伯菌属中，肺炎克雷伯菌占80%以上，是本属中最为常见的病原菌，可引起肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、菌血症等疾病。8.鉴定流程尿液、痰、血液等麦康凯琼脂平板（或中国蓝平板）呈黏液样、粉红色（或蓝色）菌落氧化酶试验阴性仪器或手工生化鉴定并做药敏试验克雷伯菌属文件更改记录修改后版本更改概述批准人生效日期3.0增加“文件更改记录”2012.1.1