实验动物的若干体能测试.ppt

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1、实验动物的若干体能测试教学目的1、了解动物应激反应的定义及动物体能测试的常规实验方法2、了解构建抗应激模型的方法和研究意义教学内容通过对小鼠负重游泳记录及密闭空间窒息实验,及测量血清乳酸脱氢酶,学习动物体能测试的常规实验方法,探究雌雄小鼠体能是否有差异。实验准备动物:小鼠。要求雌雄、年龄比例均衡。器材:鼠笼、电子天平、50cm×30cm×25cm的玻璃缸、200ml磨口广口瓶、负重物、温度计、秒表、冰箱、恒温箱。药品:钠石灰(或等量的氢氧化钠和碳酸钙)、凡士林等。什么是应激反应?应激反应是机体受

2、到各种有害刺激后产生的一种非特异性紧张反应。长期在应激状态下生活可导致机体免疫力下降,从而产生各种疾病。引起应激反应的刺激称为应激原,外界环境中过度的暴冷或暴热,内因中过度的惊恐、愤怒等情绪刺激均可构成应激原,使机体处于应激状态。(一)小鼠游泳实验根据游泳时水温的不同,可分为常温下游泳,水温常调制25~29±1℃;低温下游泳,水温可调至5~15±1℃;高温下游泳,水温可调至39~45±1℃。后两者是游泳至疲劳,外加应激。本实验以小鼠游泳时间为小鼠的体能的指标之一。【方法】玻璃缸内加水,水深20c

3、m,水温保持在20±0.5℃,在每只鼠尾部束其体重10%的重物,将小鼠分别放入玻璃缸内游泳,开始计时。注意观察,当小鼠头部沉入水中10秒中不能付出水面者即为体力耗竭,即可计时,为小鼠游泳时间。比较不同组小鼠的抗疲劳能力。【注意】1.最好小鼠单只游泳,如果2只以上同时游泳,应注意观察,不使小鼠彼此靠近,否则会影响实验结果。2.水温如升高至28~30℃和小鼠负重物较轻均会使小鼠游泳时间明显延长。(一)小鼠游泳实验实验前准备动物准备:小鼠器材准备:电子天平、玻璃缸、秒表负重物、温度计、等实验用水准备:

4、温水、热水、冷水准备正式实验在每只鼠尾部束其体重10%的重物,将小鼠分别放入玻璃缸内游泳,开始计时。注意观察,当小鼠头部沉入水中10秒中不能付出水面者即为体力耗竭,即可计时,为小鼠游泳时间。数据分析比较不同组小鼠的抗疲劳能力。体能恢复实验上述小鼠休息30分后再次入水(二)小鼠耐缺氧实验【小鼠耐常压缺氧能力测试方法】将小鼠放入盛有15g钠石灰的广口瓶内(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口盖严,使之不漏气,立即计时。以呼吸停止为标准,观察小鼠因缺氧而死亡的时间。比较各组小鼠耐缺氧的能力。【注意】1

5、.每个广口瓶最好只放一只小鼠,以防互相扰动影响耐缺氧能力测定。2.广口瓶一定要密封严格,以防漏气,否则会影响实验结果。3.广口瓶容积应适当,以小鼠能自由活动为宜。4.具有静电作用的药物也能延长缺氧死亡时间。(二)小鼠耐缺氧实验封口将小鼠放入盛有15g钠石灰的广口瓶内(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口盖严,使之不漏气,立即计时。观察记录以呼吸停止为标准,观察小鼠因缺氧而死亡的时间。结果分析比较各组小鼠耐缺氧的能力。(三)小鼠耐低温和高温实验耐低温实验常将小鼠放于-5℃以下的低温水箱内;耐高温实

6、验则将小鼠放于45±1℃的恒温箱内。观察小鼠生存时间,比较不同组小鼠的存活百分率。【小鼠的耐寒能力测试方法】各组同时将小鼠放入-5±1℃冰箱内,开始记时,2小时后将小鼠取出,统计各组小鼠存活数。【注意】1.冰箱内温度必须控制在-5℃左右。2.小鼠放入冰箱时应每个鼠笼只放一只小鼠,以防小鼠互相取暖影响实验结果。【小鼠的耐高温能力测试方法】各组同时将小鼠放入45±1℃的恒温箱内,立即计时、并密切观察。以呼吸停止为指标,观察至小鼠半数死亡,取出恒温箱内全部小鼠,统计各组小鼠存活情况。【注意】1.恒温箱

7、的温度应恒定在45±1℃,否则会影响实验结果。2.因要观测小鼠在恒温箱内半数死亡时间,故每次放入恒温箱内的小鼠数不宜过多。(三)小鼠耐低温和高温实验耐寒能力测试方法各组同时将小鼠放入-5±1℃冰箱内,开始记时2小时后将小鼠取出,统计各组小鼠存活数。耐高温能力测试方法各组同时将小鼠放入45±1℃的恒温箱内,立即计时、并密切观察。以呼吸停止为指标,观察至小鼠半数死亡,取出恒温箱内全部小鼠,统计各组小鼠存活情况实验数据统计汇总实验室所有小鼠的体能测试的数据结果,将实验室所有小鼠按照不同特征或实验处理(

8、如雌雄、年龄、体重、是非给药等)分组。计算出各组小鼠的平均游泳时间、平均耐缺氧时间,统计出在耐寒和耐高温情况下,各组小鼠的存活百分率。有兴趣的同学课后可以进行更进一步的统计处理。【重点】理解对实验动物抗应激反应的体能测试中,干扰性因素的排除。【难点】练习小鼠的正确抓取(做到既对实验操作者的安全保护又对操作对象的最小刺激)习题:1.、如何处理数据,可以得出哪些结果,并试着解释这些结果。2、如何测量血清乳酸脱氢酶,通过测量血清乳酸脱氢酶能解释什么问题?如何解释与小鼠体能的关系?

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