最新130109132 杨玉敏 实验一、维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法).doc

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1、精品资料130109132杨玉敏实验一、维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)........................................精品资料实验一维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)姓名：杨玉敏学号：130109132组号：4组实验日期：2016年/4月/7日实验地点：逸夫楼食品营养实验室7D302一、测定原理2,6-二氯酚靛酚滴定法用于测定还原型抗坏血酸。抗坏血酸分子中存在烯醇式结构（HO—C═C—OH），因而具有很强的还原性，还原型抗坏血酸能还原2,6-二氯酚靛酚染料。2,6—二氯酚靛酚染料在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶

2、液中呈蓝色。因此，当用2,6—二氯酚靛酚染料滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，被还原后红色消失成为无色的衍生物，可作为维生素C含量测定的滴定剂和指示剂。还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化为脱氢抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化时，滴下的2,6—二氯酚靛酚溶液则呈红色。在测定过程中当溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量、与样品中所含抗坏血酸的量成正比。反应式如下：二、实验仪器与试剂1.仪器(1)公用仪器①组织捣碎机；水

3、果刀；②托盘天平；精密天平；称量纸；卷纸；③1000ml烧杯；250ml烧杯；500ml、1000ml量筒；④20cm镊子；⑤蒸馏水，蒸馏水洗瓶；⑥记号笔、标签纸、定性滤纸。(2)分组及仪器：(12人一组，共4组)........................................精品资料每组仪器包括：①100ml具塞量筒(或普通量筒)；100mL棕色容量瓶，250mL棕色容量瓶；②10ml量筒；③5ml、10ml移液管；④(微量)酸式滴定管；⑤50ml、500ml烧杯；⑥50ml或100ml三角烧瓶；⑦漏斗；漏斗架；⑧台式离心机；⑨电炉；⑩吸耳球；玻

4、璃棒。2.原料及试剂本实验材料是橙子、草酸、抗坏血酸、2,6-二氯酚靛酚、碳酸氢钠，用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯。原料：橙子。(1)2%草酸溶液:草酸20g溶于700ml蒸馏水中，稀释至1000ml。(2)1%草酸溶液：取上述2%草酸溶液450ml，稀释至900ml。（以上全班统一配制）(3)抗坏血酸标准溶液：精确称取抗坏血酸20mg，用适量1%草酸溶液溶解后，移入100mL棕色容量瓶中，并以1%草酸溶液定容，振摇混匀，最好临用前配制，冰箱中保存。1mL含0.2mg抗坏血酸。(4)0.02%2,6-二氯酚靛酚溶液：称取碳酸氢钠52mg，溶解在200mL沸水中

5、。再称取2,6-二氯酚靛酚50mg，溶于上述碳酸氢钠溶液中。冷后，过滤于250ml棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。于冰箱中保存。。临用前按下法标定：取2mL浓度为0.2mg/ml的抗坏血酸标准溶液于三角瓶中，加1%草酸5mL，摇匀，用配制的2,6-二氯酚靛酚染料溶液滴定至微红色，15s不褪色即为终点，并计算如下：每1mL染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数=滴定度(T)=C×V1/V2。........................................精品资料式中：C----抗坏血酸的浓度(mg/ml)；V1----抗坏血酸的量(ml)；V2----消

6、耗染料溶液的量(ml)。三、实验步骤1.取300～500g新鲜橙子(去皮、去核)，置于1000ml烧杯内，称重，精确至0.01g。2.将样品倒入组织捣碎机，加入等量2%草酸（W∶V），加盖旋紧，匀浆2～5min。3.取出匀浆物质。（以上统一进行）4.称取10-30g匀浆物质(使其含有VC1-5mg)于50ml小烧杯中，精确度1%，编号，记录。(第一组取10g，第二组取20g，第三、四组取30g)。5.用少量1%草酸将称取的匀浆物质倒入100ml容量瓶中，并用1%草酸反复洗涤烧杯（3次），其洗涤液一并移入，并用1%草酸定容到100ml。6.加塞后将匀浆物质与1%草酸

7、充分混合，静置10min。7.取上述溶液过滤或离心。8.用移液管吸取5-10ml滤液置于三角烧瓶内，加入10ml1%草酸（2个平行样品）；用移液管吸取5-10ml蒸馏水，加入10ml1%草酸（空白对照）。(第1-3组取10ml，第4组取5ml)9.2,6二氯酚靛酚染料滴定至终点（淡粉红色，15s不褪色），记录染料消耗量。若提取液中色素很多时，滴定不易看出颜色变化，可加1ml氯仿，到达终点时，氯仿层呈现淡红色。10.计算每100g样品中维生素C的含量（ml）及平行样品误差范围，公式如下：维生素C含量（ml/100g）=[(V`1-V`2)×T/W]×100式中：V`

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