资源描述：
《矿质元素对猪苓菌丝生长发育的影响.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、矿质元素对猪苓菌丝生长发育的影响陕西农业科学矿质元素对猪苓菌丝生长发育的影响邱鹏程,梁宗锁h,陈德育(1.西北农林科技大学生命学院,陕西杨凌712100;2.陕西省中药指纹图谱与天然产物研究中心,陕西杨凌712100)?67?:提善要:采用固体培养和溶体培养神方法研究了种元素'N,PKzn)对猪苓茸丝的生长速度,于重.粗多捧含量盼影响-研究结果表明N纽处珲候避茵丝形成拱核誊并且这种现象在N的高浓处理._=_=×.■.量譬.:"i:i:申}匕低海废处理更明巽P,K:对.茵丝生长有促避辑用_瞄.NaH2
2、l:o9g/IjSO42.o9g/l,l..00.-l
3、.;cus.{_.r5H2oo.9jg/l_=I1Zns7王{.0l0.924:g/l为传0≥蠹0:≯_奠-__.≯.曩:一l_.鼻-曩:::-..::关键词.:1猪苓;:菌丝茵核;营养√参.==-:j0:l¨--_ll■i毒0舞_,猪苓(Grifolaumbellate)具有利水渗湿的功效,在我国已有逾2000a的入药史.自从现代药理证明猪苓多糖对人体免疫力和肝脏功能均有影响以及具有抗肿瘤的作用以来[】],国际国内对猪苓的需求量逐年上升E引,
4、仅依靠采挖有限的野生资源已经远不能满足需求.市场供应紧缺,一些地区开始进行人工栽培E引,但由于猪苓基础研究空白较多,栽培时仅伴栽有蜜环菌菌棒,木棒以及树叶等.菌丝是形成菌核的物质基础.陈文强,顾芳红等研究了碳,氮源对猪苓菌丝生长与胞外多糖含量的影响[引.但关于第二营养D5,~6]对猪苓菌丝生长发育有怎样的影响,尚未见研究报道.罗英,李梁分析猪苓生长的土壤条件,发现与同区域非猪苓生活土壤相比,猪苓生活土壤中含有大量N,P,K并且Cu,Zn含量较高E引.本实验就这五种元素对猪苓菌丝生长的影响进行研究.1
5、材料菌种由西北农林科技大学生命学院微生物实验中心提供.母种由采自太自山生长旺盛的猪苓菌核分离培养得到.2方法2.1菌种扩繁培养基:麸皮50g,马铃薯200g(煮水),葡萄糖20g,KHzPO4?2H2O3g,MgSO~?7HzO1.5g,琼脂15g,水1000ml.在9cm平皿中接入母种,23"C避光进行扩大培养25d.2.2培养本实验共考虑到5种元素,每个元素又包括5个不同浓度.表1元素浓度2.2.1固体培养按表1添加各元素相应浓度到PDA培养基中,制备固体培养基(30ml/I~).以PDA培养基
6、为CK.在扩繁的菌种菌龄2O～25d时沿菌落外缘用打孔器打取直径约5mm的小圆片,接种于制备好的固体培养基平皿中央.用封口膜封紧培养皿边缘,23"C暗培养,每日同一时间测量菌落直径E引,每次测3个方向取平均值E],并做好记录直至满皿.2.2.2液体培养按照表1添加各元素相应浓度到PDA去琼脂培养基中,制备液体培养基收稿日期:2o07一O4—26基金项目;陕西省中药产业发展基金项目资助(2o05～2).作者简介;邱鹏程(1982～),男,陕西省西安人,在读硕士,主要从事猎苓营养研究.通讯作者;梁宗锁,
7、教授.?68?陕西农业科学(30ml/瓶).以PDA去琼脂培养基为CK.接种方法同上.23~C转速120r/rain暗培养.从接种第5d起,每5d测量干重和粗多糖含量,至第25d.测量干重方法:将发酵鲜样过滤在事先烘干至恒重的滤纸上,蒸馏水冲洗3次,在60~C下烘至恒重[5l.粗多糖测量方法:收集干样并研碎,取0.1g粉末,10ml沸水提取4h后用蒽酮比色法测定[11].3结果与分析3.1各组处理对猪苓菌丝生长速度的影响表2固体培养的菌丝平均生长速度"##":P<0.01VSCK(O.Og/1
8、):同一列中"*":P<O.05VS●,"**":P<0.01VS●表2说明N处理组的猪苓菌丝平均生长速度低于CK组,其他4种处理的猪苓菌丝平均生长速度都高于CK组,并且差异达到极显着水平(P<o.o1),对猪苓菌丝生长起到促进作用.尤其以P和微量元素Cu,Zn的促进作用更明显.表2中P0.09g/1,K2.0g/1,Cu0.024g/1,Cu0.012g/1,Zn0.030g/1,Zn0.024g/1这几个处理平均生长速度在各自组中较快,与同组其他处理相比较,差异分别达到显着(P
9、<o.05)或极显着水平(P<o.01).既然N对猪苓菌丝生长速度起抑制作用,那为什么猪苓生活土壤中比同区域非猪苓生活土壤中N的含量要明显的高呢,我们在实验中观察到以下现象.3.2菌丝拟核化情况7～8d时N组处理的菌丝开始形成幼小的白色拟核.之后拟核会进一步生长,并分泌无色液体.最后拟核变成类似于猪苓菌核表面的有油漆样光泽的灰黑色,分泌出的液体颜色也会逐渐变深.这种现象在N的高浓度处理度比低浓度处理更明显.P,Cu,Zn,CK四组处理中只有个别皿10d之后
