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《猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞微载体上培养条件的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞微载体上培养条件的研究试验研究?37?广东畜牧兽医科技2010(箍35鲞箜塑猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc一145细胞微载体上培养条件的研究穆光慧,李嘉爱,齐冬梅(广东永顺生物制药,广东广州511356)摘要:通过研究搅拌程序,细胞接种密度,微载体浓度与细胞生长的关系,探索Marc一145细胞在微载体上的生长条件,并测定猪繁殖与呼吸综合征病毒在微载体培养的细胞上的TCID结果表明:细胞接种密度为4.28×105cel1s/mL时,病毒滴度可达到1O~.sTCIDs0,这说明利用微载体繁殖PRRSV是可行的,为猪繁
2、殖与呼吸综合征疫苗的大规模生产奠定实验基础.关键词:Mare一145细胞;猪繁殖与呼吸综合征病毒;微载体中图分类号:$856文献标识码:A文章编号:1005—8567(2010)04—0037—04CultureofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusonMarc.145cellmicrocarriersMuGuanghuil,LiJiaail,QiDongmei'(GuangdongWinsunBio—pharmaceuticalCo.,Ltd,Guangzhou511356,China)Abs缸鼍I
3、ct:Thegrowthcondition0fMarc.145eellonthesurfaceofmicrocarrierswasinvestigatedinthisexperimentbyresearchingontherelationshipbetweentheagitationprocedure,densityofcellsinoculated,microcarrierconcentrationandthegrowthofMarc.145cel1.andtheTCⅡ)5OtiterofPRRSVwasdetectedalso.Theresultindi
4、catedthattheviraltitercouldreach107.5TCII)50whenthedensityofcellsinoculatedWaS4.28x105cells/m1.Itwasfeasibletopropagatetheporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusonmicrocarriers.whichlaidtheexperimentalfoundationformassproductionofPRRSvacc:ine.K:Marc-145cell;porcinereproducti
5、veandrespiratorysyndromevirus;microcarriers猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSv)引起的一种严重危害养猪业的传染病[1I.20世纪80年代,美国首先报道了一种在猪群中发生的新的灾难性疾病翻.1991年,荷兰中央兽医研究所确定该病的病原是一种新的RNA病毒,并命名为Lelystad病毒.1996年郭宝清同等首次从疑似PRRS感染的猪群中分离到了PRRSV,证实本病已存在于我国.2006年4月同我国猪群暴发
6、了高致病性繁殖与呼吸综合征,给养猪业造成了巨大的经济损失.所以该病引起了国内外学者的高度关注,对其研究也不断深入.我国目前控制PRRS的主要方法是使用疫苗进行免疫预防,高滴度的病毒液是疫苗生产中非常重要的一个环节.利用微载体培养Marc一145细胞繁殖PRRSV有许多优点,如提高生产能力,减少对培养基和劳收稿日期:2010-05—10:通讯作者基金项目:广东省农业科技重大专项(20O8AO201O0O20)动力的需求,降低污染的风险等.本实验旨在摸索PRRSV在微载体Cytodex一3上的生长条件,为PRRS疫苗的大规模生产奠定试验基础.1材料与方法1.1材
7、料1.1.1细胞和培养基Marc一145细胞由广东永顺生物制药保存;培养基为GIBCO公司MinimumEssentialMedium.1.1.2毒株PRRSGD-07-02株,由广东永顺生物制药分离,鉴定,保存.1.1.3试剂和仪器微载体Cytodex-3(CT-3)为美国GE通用电气产品;Micro-Stir~低速磁力搅拌器和Celstir~双侧臂细胞生物反应器(培养瓶)均为美国wheaton公司产品;二甲基二氯硅烷为Sigma公司产品;XDS一2型倒置显微?38?试验研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc一145细胞微载体上…一穆光慧,等镜为广州粤显光学
8、仪器有限责任公司产品.1.2方法1.2_1玻璃器皿的
