西安地区青少年骨密度值及其与维生素d受体基因多态性的研究

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1、西安地区青少年骨密度值及其与维生素D受体基因多态性的研究【摘要】目的提供西安地区9-12岁青少年腰椎骨密度(BMD)的正常参考值，研究维生素D受体基因(VDR)多态性与9-12岁青少年BMD的关系。方法收集排除影响骨代谢疾病的西安地区9-12岁汉族儿童200例，进行问卷调查、体格测量；用双能X线骨密度仪(DEXA)测量腰椎BMD；用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法(PCRRFLPs)，分析VDR基因的2个限制性酶切位点BsmⅠ、FokⅠ的多态性分布。结果①各组青少年腰椎BMD值均随年龄增长而逐渐增

2、高，且与年龄呈显著正相关(P<0.001)。9-10岁男、女性之间BMD无明显差异(P>0.05)，11岁以后女性BMD高于男性(P<0.05)；②各组青少年身高(P<0.001，r=0.418-0.582)、体重(P<0.05，r=0.627-0.816)与BMD均呈明显正相关；③ff基因型BMD低于Ff与FF基因型，分别为(0.631±0.064)g/cm2、(0.654±0.012)g/cm2和(0.689±0.058)g/cm2，差异有统计学意义(F=9.24，P&l

3、t;0.05)。结论VDR基因在FokⅠ酶切位点的多态性与9-12岁汉族青少年BMD相关。【关键词】骨密度；基因多态性；维生素D受体；青少年　　ABSTRACT:ObjectiveToobservethebonemineraldensity(BMD)ofHan9-12childrenagedfrom9to12yearsoldinXian,andtherelationbetinDreceptorgenepolymorphismandbonemineraldensity.MethodsTotally200c

4、asesof9-12yearoldHanchildrenetabolismdiseaseslyselected.Questionnaireinvestigationandphysicalmeasurementofheightandade.BMDeasuredbydualenergyXrayabsorptiometry.VDRgenepolymorphism(cleavagedbyrestrictionendonucleaseofBsmⅠandFokⅠ)busassandagealesandmalesu

5、nder11yearsold,butfemaleshadahigherBMDthanmalesbetbusorphisminthesitecleavagedbyrestrictionendonucleaseofFokⅠisrelatedtoBMDofHanchildrenaged9-12years.　　KEYD)是决定骨强度的主要因素之一，能够预测骨折的发生率。它受年龄、性别、遗传、营养状况、雌激素水平等的影响，其中遗传因素是BMD的主要影响因素。确认影响BMD的遗传因素，对于阐明骨质疏松症病理生理机制以

6、及早期预测骨质疏松发病的危险因素具有重要意义。本研究检测了我国西安地区9-12岁汉族青少年BMD以及维生素D受体基因(vitaminDreceptor,VDR)BsmⅠ、FokⅠ2个等位基因型的分布频率，探讨VDR基因多态性与9-12岁汉族青少年BMD的关系。　　1对象和方法　　1.1对象随机抽取2003年7月至2005年7月在我院门诊就诊的9-12岁青少年200名(男100名，女100名)，询问疾病史和家族史，并进行体格检查排除影响骨代谢疾病。其中满9周岁不满10周岁归为9岁年龄组(男25名，女25名)

7、，满10周岁不满11周岁归为10岁年龄组(男25名，女25名)，以此类推。为了排除雌激素对BMD的影响，故要求女性研究对象为尚未有月经初潮者。　　1.2方法　　1.2.1问卷调查主要内容包括年龄、性别、民族、有否骨折病史和长期服用影响骨代谢的药物等。由专人按照方案设计要求，询问家长。　　1.2.2身高、体重的测量使用专用身高体重测量仪，按文献[1]的要求测量。　　1.2.3BMD的测定采用美国Hologic公司生产的HologicQDR2000型双能量X线骨密度仪(DEXADualEnergyXrayA

8、bsorptiometry)。为保证机器扫描的质量，应用HologicQDR2000型自动内部质量保证和控制系统进行工作，精密度为0.4%。由专职测量员测量第2-4腰椎正位骨密度，准确定位后，开始扫描，由微机自动分析并打印结果。　　1.2.4VDR等位基因的测定取1mL新鲜静脉血，用申博公司提供的基因组DNA抽提试剂盒抽提外周血白细胞中DNA。设计特异性的引物2对[2]，见表1。　　分别按照下列条件进行PCR反应：基因组DNA