agilent 1200 hplc sop(详)

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1、Agilent1200高效液相色谱仪操作规程开机1将待测样品按要求前处理，准备HPLC所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。4操作顺序4.1旋松Purge阀。4.2从“仪器”菜单中选择“设置泵”选项，进入泵编辑界面，也可由界面图标进入编辑参数。4.3设定流速：3-5ml/min，并设排气的溶剂比例为100%，单击确定。4.4单击桌面泵图标右下角控制开关，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，然后依次设置其他溶剂比例为100%，切换通道继续Purge，直到所有要用的通道无气泡为止。4.5将流速调整为1.0mL/min,单击桌面泵图标右下角控制开关，即关泵，

2、关紧Purge阀。4.6单击界面泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积或无溶剂时停泵，单击确定。5数据采集方法编辑5.1开始编辑完整方法：在主菜单“方法”项下“编辑完整方法”，选择方法信息、仪器采集、运行时选项表，单击确定，进入下一界面。5.2方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如方法的用途等），单击确定，进入下一界面。5.3设置泵：在“流速”处输入流速，“停止时间”处输入停止采集的时间，“溶剂”处输入各通道比例，“压力限”处输入压力限制设定（一般为200bar），若需梯度洗脱，则在“时间表”处输入时间、溶剂组成等梯度洗脱参数。单击确定，进入下一界面。5.4设置进

3、样器：选择合适的进样方式，一般选洗针进样；“标准进样”只能输入进样体积，此方式无洗针功能；“洗针进样”可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针；“使用进样器程序”可以点击键进行进样程序编辑。单击确定，进入下一界面。5.5柱温箱参数设定：在“温度”下面的方框内输入所需温度，并选中它，点击“更多”键，选中“与左侧相同”----使柱温箱的温度左右一致。单击确定。5.6检测器参数设定5.6.1DAD检测器参数设定：在“信号”下方的空白处输入所需的检测波长和参比波长及其带宽，在“光谱“下选择存储方式，在“所需的灯”下选择灯类型，单击确定，进入下一界面。5.6.2ELSD检测

4、器参数设定：如果需用DAD检测器则选择SilentMode；如果需用ELSD检测器则不选SilentMode，此时在界面设定温度、气体流量及增益值（一般为1）。5.7当出现“运行时选项表”单击确定。5.8保存方法：从“方法”项下选择“方法另存为”选择路径进行操作，输入文件名，单击确定。6进样6.1点击桌面上“启动”，即进行系统的平衡。6.2编辑序列进行自动进样。6.3在主菜单“序列”项下选择“序列参数”，在窗口中“数据文件”下选择路径及子目录及数据采集的记录方式。6.4在主菜单“序列”项下选择“序列表”，在窗口中填写样品瓶、样品名称、方法名称、进样次数、样品量、进样量等信息，单击确定。6.5保

5、存序列。6.6点击桌面上“开始”按钮即进行采集样品。7数据分析方法编辑（打开仪器2脱机）7.1从“序列模块”菜单中，单击“数据分析”进入数据分析界面。7.2从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名，单击确定。7.3积分7.3.1从“积分”中选择“自动积分”，如积分结果不理想，再从菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的斜率、峰宽、最小峰面积、最小峰高及肩峰。7.3.2从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。7.3.3如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。7.3.4单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。8打印报告8.1从“报告”菜单中选择“设定报告”选项出现设定

6、报告窗口，在报告格式中选“性能报告”。8.2从“报告”菜单中选择“打印报告”选项，则报告结果将打印在屏幕上，如要输出到打印机上，则单击报告底部的“打印”钮。9关机9.1洗柱：先用水-甲醇（90：10）冲洗至原纪录压力，再用100%甲醇冲30分钟。在使用ELSD后先撤去流动相，再用氮气吹扫检测池30分钟。9.2先退出化学工作站及其它窗口，再关闭计算机。9.3关掉Agilent1200LC各模块电源或ELSD检测器电源，并在《色谱仪器使用记录》上登记冲洗柱子记录。注意事项1定期检查排液阀的滤芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。2定期清洗溶

7、剂过滤头（35％浓硝酸浸泡1小时，不要使用超声波清洗）。3流动相应经过0.45um或更小孔径的滤器过滤，如果使用滤膜，注意有机膜与水膜的区别(聚四氟乙烯能适用于所有溶剂)。4样品进样之前最好过滤，如果样品量太少，可以用内插管。5在采集样品结束后应用流动相冲洗管路至少30分钟，再用甲醇－水系统冲洗管路。注意清洗在线脱气机及比例阀，尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路，使用纯水冲洗后，再使用甲醇冲洗，可以