实验诊断学实验报告(牡丹江医学院)

实验诊断学实验报告(牡丹江医学院)

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1、实验诊断学试验操作报告目录一、红细胞计数试验二、血红蛋白测定三、白细胞计数四、白细胞分类计数五、尿比重六、尿沉渣定性检查七、尿蛋白检查磺基水杨酸法八、尿干化学分析九、尿葡萄糖定性检查(班氏法)十、ABO血型测定红细胞计数试验实验目的:通过红细胞计数实验1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。2、掌握血细胞计数板的结构试验器材:血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、生理盐水实验原理:一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中显微镜下计数一定容积内的细胞,再换算成每升标本的细胞数报告。操作步

2、骤:1、取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内,上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。6、待2—3分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。红细胞计数的区域:中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。计数原则:数上不数下,数左不数右的计数原则即凡

3、压在中方格边线(双线)上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。计算:答案不唯一,言之有理即可红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106或红细胞数/L=5个中方格内红细胞数÷100×1012式中×55个中方格换算成1个大方格×101个大方格容积为0.1ul,换算成1.0uL。×201血液的稀释倍数×106由u1换算成L数据处理:RBC:×l012/L参考值男:(4~5.5)×1012/L   女:(3.5~5)×1012/L新生儿:(6~7)×1012/L注意事项:1、吸管

4、、试管要注意清洁、干燥以防溶血,操作迅速避免血液凝固,如有血凝块应重新采血。2充液前,红细胞复液要充分摇匀,红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀,不可有气泡,亦不可有多余液体外溢。3、中方格内红细胞分布应均匀,健康成人每中方格红细胞数约为80—100个,各中方格内之红细胞相近,如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。血红蛋白测定实验目的:通过血红蛋白测定1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。试验仪器:试管、微量吸管、分光光度计实验原理:血红蛋白中的亚铁离子(Fe2

5、+)被高铁氰化钾氧化成高离子(Fe3+),血红蛋白转化成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白与氰离子(CN-)结合,生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从HicN参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。操作步骤:1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟2、用721光电比色仪,540nm波长,试剂为空白调0点比色,读取光密度,查标准曲线得结果。计算:血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×367.7数据处理:答案不唯一,言之有理即可Hb:g/L参考值男0.40~0.54L/L女:0.37~0.48L/L儿

6、童:0.35~0.49L/L新生儿:0.50~0.60L/L注意事项:1、做血红蛋白测定,白细胞计数和分类计数,在采血时应先做血膜再做红细胞,然后做白细胞,血红蛋白检验,避免红细胞破坏。白细胞计数实验目的:掌握白细胞计数显微镜计数法原理及技术。实验器材:显微镜、微量吸管、计数板、盖玻片、白细胞稀释液。实验原理:用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经过换算求得每升血液内的白细胞数。操作步骤:1、取试管1支,加白细胞稀释液0.38ml。2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取

7、末梢血20微升或抗凝血20微升。3、擦去管尖外部余血、轻轻注入稀释液底部,再吸取上清液清洗3次,摇匀。4、将计数板与盖玻片用软布擦净,将盖玻片覆盖于计数池上,再用微量吸管吸取悬液,充入计数池与盖玻片间的细缝隙中,静止2-3分钟,待白细胞下沉。5、用低倍镜计数四角的四个大方格内的白细胞数。计算:(四个大方格内WBC数/4)×10×20×106=WBC数/20×109/升数据处理:答案不唯一,言之有理即可正常参考值:成人:(4-10)×109/升新生儿:(15-20)×109/升6月-2岁:(11-12)×109/升白细

8、胞分类计数实验目的:掌握白细胞分类计数、原理及技术。实验器材:显微镜、染色缸和架,载玻片、瑞氏染液、香柏油、二甲苯。实验原理:把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,经wright染色后,显微镜下观察,根据白细胞形态特点逐个分类计数。得出各种白细胞的相对比值,并注意观察其形态和质量的变化。操作步骤:1、取末梢血1滴。置于载玻片的一端,以边缘平滑的推片

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