子宫内膜癌患者组织中雌激素受体mrna和蛋白的表达及其意义论文

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1、子宫内膜癌患者组织中雌激素受体mRNA和蛋白的表达及其意义论文【摘要】目的探讨子宫内膜癌患者组织中雌激素受体α和β（ERα和ERβ）mRNA和蛋白的表达及其意义。方法采用RT-PCR和免疫组织化学法检测25例子宫内膜癌组织和22例正常子宫内膜组织中ERα、ERβmRNA和蛋白的表达水平，并分析比较子宫内膜癌不同手术分期和组织学分级雌激素受体α和βmRNA和蛋白的表达水平。结果与正常子宫内膜组织比较，子宫内膜癌组织ERα、ERβmRNA的表达明显降低（P＜0.05），ERαmRNA的表达随内膜癌临床分期和组织学分级的进展呈下降趋势，

2、ERβmRNA的表达则随内膜癌临床分期和组织学分级的进展呈升高趋势。正常子宫内膜组织ERα、ERβ表达连续、均匀，主要在上皮细胞核内，间质细胞有少量表达；子宫内膜癌组织中ERα、ERβ分布不均匀，染色强度弱。与正常子宫内膜组织比较.freelTodescussionestrogenreceptorαandβ(ERαandERβ)mRNAandproteinexpressionanditssignificanceinendometrialcancerpatients.MethodsERα,ERβmRNAandproteinetria

3、lcarcinomaand22casesofnormalendometriumbyRT-PCRandimmunohistochemistry.ERαandERβmRNAandproteinexpressionlevelsetrialcancertissue.Resultsparedalendometrium,ErαandERβmRNAexpressionsetrialcarcinoma(P＜0.05).ERαmRNAexpressioninendometrialcancerRNAexpressioninendometrialcan

4、cerinnormalendometrium,mainlyintheepithelialcellnucleus,asmallamountexpressinstromalcells.ERαandERβdistributionetrialcarcinoma.paredalendometrium,ERαexpressionsetrialcarcinoma(P0.05).ERαandERβpositiverateofendometrialcanceretrialcarcinoma.ERβpositiverateofendometrialc

5、anceretrialcarcinoma.ConclusionTheloayberelatedetrialcancer.【KeyetrialCancerEstrogenReceptorαEstrogenReceptorβ子宫内膜癌是女性生殖系统的最常见恶性肿瘤之一，其发病原因不明，通常认为与过多雌激素刺激有关1。雌激素通过与雌激素受体（ER）结合后刺激内膜增生，因此，雌激素受体可能在子宫内膜癌的发生发展起非常重要的作用。本研究旨在探讨ERα、ERβmRNA和蛋白的表达变化及其临床意义。1对象与方法1.1研究对象子宫内膜癌患者25例

6、，年龄55.8±7.3岁。采用国际妇产科联盟（FICO）2000年制定的手术病理分期，其中Ⅰ期14例，Ⅱ期7例，Ⅲ期3例，Ⅳ期1例；组织学分级：G1期11例，G2期10例，G3期4例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织22例作对照。1.2RT-PCR测定ERα、ERβmRNA表达新鲜组织匀浆用Trizol试剂提取总RNA，再逆转录成cDNA。参照文献2,3合成引物，以GAPDH为内参。PCR反应条件：94℃预变性5min，94℃45s，54℃（ERβ是50℃）45s，72℃延伸1min，35个循环，最后72℃延伸

7、10min。取PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳，利用图像分析系统进行分析，目的基因与GAPDH灰度比值为mRNA相对表达量。1.3免疫组化检测ERα、ERβ蛋白表达每个石蜡块连续切片，共4张，片后5μm，其中一张作HE染色，用于病理诊断；其余经高压加热法修复抗原后非免疫血清孵育30min，37℃，DAB显色，苏木素复染。显微镜下观察，子宫内膜腺上皮细胞核内有棕黄色颗粒为阳性，根据阳性细胞所占全部肿瘤细胞的百分比判定结果4。每张切片取5个视野，计算每个视野中阳性细胞百分数，取平均值。ERα、ERβ单克隆抗体购自SantaCruz公

8、司，免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。1.4统计学方法计量资料采用t检验和方差分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1ERα、ERβmRNA的表达与正常子宫内膜组织比较，子宫内膜癌组织ERα、ERβm