pass选择抗体的金标准

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1、抗体，是我们非常熟悉的一种生物试剂， 但我们对抗体的鉴定，选择又了解多少呢？行业内提出全新的抗体选择标准“PASS”。通过客观的参数指标和专家的观点，科研人员只需要仔细的阅读抗体的说明书，再结合 “PASS”的抗体选择标准，就可以在一定程度上自己鉴定选择抗体的品质。 “PASS”抗体选择标准是指科研人员在选择抗体的时候，应留意抗体说明书中Purification抗体纯化工艺Antigen抗原信息Specificity抗体的特异性Source抗体的种属宿主选择 Purification抗体的优劣，包括特异性，效价等方面和生产抗体过程中使用

2、的纯化工艺是直接相关。但科研人员在选择抗体的时候去常常忽略这个方面。在行业内，使用蛋白A或G纯化单克隆抗体的方法被广泛接受。那么，多克隆抗体纯化工艺呢？很多公司都使用亲和纯化（affinitypurification）的方法来纯化多克隆抗体，该技术的关键在于使用的亲和原（affinityligand）。为了得到效价更高，特异性更好的抗体，一流的抗体公司尽可能使用全蛋白做为亲和原去得到优质的抗体，而且常常还会进行第二步的蛋白A或G的分化。相反，使用多肽作为亲和原，纯化到的多抗表位有限，多抗的效价和特异性都会大打折扣。因此，一流的抗体公司的

3、多克隆抗体的效价，特异性的优势明显，而且很多多克隆抗体可以用于中和和阻断实验。所以请各位科学家在选择抗体的时候注意抗体纯化方式：专家观点哥本哈根大学Dr.JohnCouchman认为优质抗体，尤其是多抗，应该是2步纯化：NotonlymustIaffinitypurifytheantibodybutalsoperformantigenadsorptiononmytissuessections.Unfortunately,manycommercialantibodiesarenotaffinitypurifiedfromserum.哈佛大

4、学神经学院的主任Dr.CliffordSaper在公开发表的文章中指出经过抗原亲和纯化的抗体的特异性更好：Affinitypurifyantiserabyrunningthemoveracolumntowhichtheantigenisfixedtoasupportmatrix.Suchantiseraarelesspronetoartifactandtendtohavelowerbackgroundstaining.Antigen抗原作为抗体生产的“原材料”之一，对于抗体质量的影响自然不言而喻。 目前用于抗体生产的抗原主要有两种：一种

5、是使用仪器合成的不具备生物活性的多肽。使用多肽作为抗原的有三个缺点：(1)使用多肽来源的抗体所做的实验结果重复性较差；(2)因为很多公司并不提供作为抗原的多肽序列信息，因此对发表论文或者科研数据方面都有潜在的风险；(3)一般而言，较活性全蛋白来源的抗体，多肽来源的抗体的特异性和效价都比较低。一流的抗体公司坚持使用具有活性的全蛋白作为抗原，由此得到的抗体效价，特异性和可重复性方面更胜一筹。由此得到的抗体自然识别样本的能力和准确性也更高。专家观点科研人员认为对于那些不提供多肽信息的抗体，科学界是应该抵制的。Theantigenisnotcl

6、earlystated。 Sometimesfor “proprietary” reasons,detailsontheantigenarewithheld.Thisisnotgoodscience,andweshouldboycottthoseantibodies. 依然是哈佛大学研究人员的观点：使用那些没有多肽信息的抗体是难以得到可重复的实验结果，也不适合于严谨的科学研究。Severalmanufactureshaveclaimedthatsequenceinformationontheantigenwas“proprietary,

7、”andtheywouldnotprovideit.Becauseworkusingtheseantibodiesisinherentlynotrepeatable,suchpapersarenotacceptableforpublication. Somecompaniesarewell-knownforkeepingtheexactsequenceoftheimmunizingpeptideasa“tradesecret”.Investigatorsshouldbeawarethatsuchantiseraarenotfitforu

8、seinseriousscientificwork. 哈佛大学的CliffordSaper教授在公开发表的文章中更是直接指出：永远不要使用抗原信息的抗体，这样的研究成果既不科学，也不能被发表！Neverbu