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《wst 341-2011 血红蛋白测定参考方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICs11.020C50中华人民共和国卫生行业标准Ws/T341-ˉ2011血红蛋白测定参考方法ReferenceⅡnethodforhaemoglobinometryinhumanblood2011-09-3o发布2012-04-015安方毡一中华人民共和国卫生部发布Ws/T341-ˉ2011目刂舀本标准按照GB/T1.1-⒛09给出的规则起草。本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出。本标准主要起草单位:卫生部临床检验中心。本标准主要起草人:彭明婷、谷小林、李臣宾、施丽飞、陆红、申子瑜。Ws/T341-ˉ2
2、011血红蛋白测定参考方法1范围本标准规定了血红蛋白测定参考方法的技术要求。本标准适用于建立并运行血红蛋白测定参考方法的实验室。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1血红蛋白hemog1oun,HGB/Hb存在于血液中所有的血红蛋白衍生物,包括脱氧血红蛋白、氧合血红蛋白、硫化血红蛋白、碳氧血红蛋白和高铁血红蛋白。2.2仅化商铁血红蛋白haemigⅡobincyanide,HiCN血红蛋白(除硫化血红蛋白外)中的亚铁离子被氧化成高铁离子,再与氰离子结合形成的血红蛋白衍生物,即氰化高铁血红蛋白。2.3参考方
3、法referencemethodwww.bzfxw.com一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术,该技术要有依据,可提供足够准确和精密的实验数据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法,参考方法的准确性必须与决定性方法进行比较,并且应标示不准确度和不精密度。3总则为了保证参考方法检测结果的准确性,建立参考方法的实验室应与其他参考实验室进行结果比对。4原理血红蛋白分子中的亚铁离子(Fe2+)在溶液中被高铁氰化钾氧化成高铁离子(Fe3+)形成高铁血红蛋白(Hi),其后又与氰离子(CNˉ)反应生成氰化高铁
4、血红蛋白(HCN),HCN在波长540nm处有最大吸收峰,HCN吸光度严格遵循朗伯-比尔定律,即HCN在波长540nm的吸光度值与HCN浓度成正比,血红蛋白浓度可由分光光度计所测定的吸光度值计算得出。5-般技术要求5.1设备5.1.1玻璃器具试验所用的玻璃器具应为A级。Ws/T341ˉˉ2011规格要求:正向置换式微量加样器或吸量管100uL±0.5uL、0.5mL±0.005mL,容量瓶25mL±o,03mL、100mL±0.08mL、250mL±0.12mL、1000mL±0.3mL。5.1.2薄膜过滤器:
5、由低蛋白结合和低释放材料制成,过滤器半径为25mm,薄膜孔径为0,⒛um~o,25um。5.1.3分光光度计:所用的分光光度计应经计量部门检定合格,仪器的狭缝宽度≤2nm,配对比色杯的内径为1.000cm±0。002cm。5.2试剂(文-齐氏液,vanKampeⅡandz刂Istrareagent)5.2.1文-齐氏液的组成KCNO。o5ogK3Fe(CN)60.20ogKH2P04(无水)0.140g非离子表面活性剂0.5mL~1.0mL临床实验室试剂用水,I级1000。OmL临床实验室I级试剂用水应满足以下
6、指标:细菌数(10αV/mL;25℃条件下电阻抗)10mΩ·cm;硅含量(Sio2)(0.05mg/L。所用化学试剂应为不含结晶水的分析纯。非离子表面活性剂可使用NonidetR40或THtonⅪ1oo。试剂中的氰化钾为剧毒物质,应规定相应的生物安全防护和处理要求。5.2.2试剂为清亮的淡黄色溶液,不吸收波长大于480nm的光。pH为7.0~7.4,渗透压为6mOsm/(kg·H20)~7mOsm/(kg·H2O)。试剂应可使血红蛋白在5min内完全转化成氰化高铁血红蛋白。www.bzfxw.com5.2.3试
7、剂应保存于较大且密封的棕色硼硅酸盐玻璃瓶内,室温避光保存,不能冷冻。如有浑浊物生成,应重新配制。至少每月重新配制一次。5.3血标本的采集5.3.1用真空采血系统采集新鲜静脉血。采血时要避免皮肤消毒物质的污染。标本中不得有肉眼可见的小凝块或溶血。5.3.2采集标本时使用EDTA为抗凝剂,要求加人血液后抗凝剂的终浓度为3.7umol/mL~5.4umol/mL,可以使用以下几种抗凝剂:——EDTA·K2(相对分子质量368.4),浓度为1.4m酽mL~2。Om酽mL;——EDTA·K2·2H20(相对分子质量404
8、.5),浓度为1.5mg/mL~2.2mg/mL;——EDTA·K3·2H20(相对分子质量442.5),浓度为1.6m酽mL~2.4mg/mL;——EDTA·N助·2H20(相对分子质量372.23),浓度为1.4mg/mL~2.0m酽mL。5.3.3血液加人抗凝管后,管内剩余空间至少占试管体积的⒛%,以利于血标本的混匀。5.3.4标本采集后应在当天完成测定。6测定步骤6.1标本稀释
