抗 a 、抗 b 血型定型试剂(单克隆抗体)

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1、抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）KangA、KangBXuexingDingxingShiji(Dankelongkangti)Anti-AandAnti-BBloodGroupingReagents(MonoclonalAntibody)本品系用A血型单克隆抗体或B血型单克隆抗体配制而成，用于鉴定人ABO血型。1基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合凡例的要求。2制造2.1专用原材料2.1.1杂交瘤细胞杂交瘤细胞建株，需经几次克隆筛选，以100％克隆孔上清相应抗体阳性的作为原始细胞株。原始细胞株经

2、传代，稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株为主细胞。杂交瘤细胞库的建立及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。工作细胞库经血凝效价测定合格后方能用于生产。2.1.2染色剂抗A可选用次甲基兰等蓝色染料、抗B可选用吖啶黄等黄色染料配制至适宜浓度。2.1.3防腐剂可选用叠氮钠、硫柳汞钠盐等，配制至适宜浓度。2.1.4稳定剂可选用蛋白质、葡萄糖、盐类等配制至适宜浓度，不得使用凝聚胺、聚乙二醇等促凝剂用于配制稳定剂。2.2制备程序2.2.1杂交瘤细胞培养物上清液的制备抗A血型或抗B血型杂交瘤细胞经培养传代，待杂

3、交瘤细胞过度生长后收取培养液上清．检测血凝效价合格后扩大培养即得。2.2.2小鼠杂交瘤腹水的制备2.2.2.1小鼠腹腔预处理健康BALB/c小鼠腹腔用石蜡油预处理。2.2.2.2接种检测抗A血型或抗B血型杂交瘤细胞培养物上清液抗体血凝效价合格后，用生理氯化钠溶液或不完全培养液重新悬浮细胞，接种于数天前用石蜡油处理过的小鼠腹腔内。2.2.2.3腹水的收集接种后数周，处死小鼠收集腹水，离心去沉淀，以适当方法除纤维蛋白原，加入适宜的防腐剂，－30℃及以下保存。2.3半成品2.3.1半成品配制合并杂交瘤细胞培养物上清，可加入少量腹水

4、混合，加入染色剂，使抗A血型定型试剂呈蓝色，抗B血型定型试剂呈黄色，除菌过滤。2.3.2半成品检定按3.1项进行。2.4成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。2.4.2分装与冻干应符合“生物制品分装与冻干规程”规定。2.4.3规格应为经批准的规格。2.4.4包装应符合“生物制品包装规程”规定。3检定3.1半成品检定3.1.1效价测定取抗A血型试剂、抗B血型试剂及国家参考品，2倍系列稀释至适宜稀释度，分别加入相应的2％A1、A2、A2B、B血型红细胞悬液，同时设红细胞悬液对照，置18～25℃反应15分钟，以1000

5、转/分钟离心1分钟后观察结果。抗A血型试剂对A1、A2、A2B血型红细胞的凝集效价应分别不小于1：128、1：32、1：16，抗B血型试剂对B血型红细胞的凝集效价应不小于1：128，且不得低于国家参考品同步测定结果。3.1.2特异性于抗A血型试剂、抗B血型试剂中分别加入2％A1、A2B、B、O血型红细胞悬液，同时设红细胞悬液对照，置18～25℃反应15分钟，以1000转/分钟离心1分钟后观察结果，抗A血型试剂应与A1、A2B血型红细胞产生凝集，与B、O血型红细胞不产生凝集；抗B血型试剂应与B血型红细胞产生凝集，与A1、O血型

6、红细胞不产生凝集；且均不应出现溶血和其他不易分辨的现象。3.1.3冷凝集素和不规则抗体测定单人份3例A型、3例B型、10例O型红细胞，分别用生理氯化钠溶液、20%牛血红蛋白生理氯化钠溶液配制2%及5%浓度，2%红细胞悬液在4℃、18-22℃、37℃进行测试；5%红细胞悬液在18-22℃、37℃进行测试。所有测试结果均不产生凝集反应或溶血现象。3.1.4无菌检查依法检查（附录XIIA）含有蛋白成分的液体组分，半成品分装后留样做无菌检查，采用直接接种法，应符合规定。3.1.5稳定性试验37℃至少放置7天(有效期为一年)或14天(

7、有效期为两年),检定结果应符合3.1.1～3.1.4项要求。3.2成品检定3.2.1外观抗A为透明或微带乳光的蓝色液体，抗B为透明或微带乳光的黄色液体，不应有摇不散的沉淀或异物。3.2.2效价侧定按3.1.1项进行。3.2.3特异性按3.1.2项进行3.2.4冷凝集素和不规则抗体测定按3.1.3项进行。3.2.5亲和力将抗A、抗B血型试剂分别与10％红细胞悬液于瓷板或玻片上混匀，抗A血型试剂与A1、A2、A2B血型红细胞出现凝集的时间应分别不长于15、30、45秒；抗B血型试剂与B血型红细胞出现凝集的时间应不长于15秒，且在

8、3分钟内凝集块必须达到1mm2以上。3.2.6稳定性试验37℃至少放置7天(有效期为1年)或14天(有效期为2年),检定结果应符合3.2.1～3.2.5项要求4保存及有效期于2～8℃避光保存，自组装之日起，按批准的有效期执行。5使用说明应符合“生物制品包装规程”的规定及批准的内容。抗A、抗