抗凝血酶iii(at iii)活性测定

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1、操作规程出凝血6.1抗凝血酶III（ATIII）活性测定（第四版）出凝血6.2原理：抗凝血酶III能和凝血酶形成复合物，使之丧失转化纤维蛋白原为纤维蛋白的酶活性。在血浆中加入过量的凝血酶后，凝血酶与血浆中的ATIII形成1︰1复合物，剩余的凝血酶作用于显色剂，裂解出显色基团，其显色程度与血浆中的ATIII活性呈负相关。出凝血6.3标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生

2、气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在0.5～1.0ml的小试管中快速冷冻，储存于-20℃冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。出凝血6.4试剂：试剂购于天津威士达公司ATIII试剂盒：试剂盒代号OWWR15。试剂包括6×15ml凝血酶试剂；6×3ml底物试剂；1×100ml缓冲液。凝血酶试剂每瓶

3、用15ml缓冲液复溶，室温平衡30分钟。底物试剂每瓶用3ml4操作规程蒸馏水复溶，室温平衡30分钟。出凝血6.5仪器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。出凝血6.6操作：按仪器操作步骤执行标准操作。出凝血6.６.1开机：按下机器侧面的POWER按钮。开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。出凝血6.６.2检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。（一次性最多可放1000个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的

4、量和有效期。如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选ReagentSetting，按屏幕显示放置试剂。3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶出凝血6.６.3准备标本：将样本放入样本架，再将样本架放到仪器进样器上。出凝血6.６.4输入检测项目：主菜单上按下WorkList键，进入工作菜单，输入AT-III项目。出凝血6.６.5输入样本号：按屏幕下菜单的IDNo.键，按顺序输入样本的序号。出凝血6.６.6开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角START键，开始检测。出凝血6.7质量控制：使用德灵公司的leve11质控品做质量控制。每批质控品的值不超过2SD。（详见出凝血

5、1质量控制）4操作规程出凝血6.8计算：仪器自动计算出结果。出凝血6.9参考值：75～125%，由DADEBEHRING公司推荐。出凝血6.10临床意义：遗传性AT-III缺乏可分为两型：CRM-型，即抗原与活性均下降。CRM+型，抗原正常，活性下降。遗传性AT-III缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，本病患病率约1/5000，发病多在10-25岁，患者常在手术后、创伤后、感染后、妊娠或产后发生静脉血栓，并可反复发生血栓。CRM-患者血浆中AT-III生物活性与抗原性约为正常人的50%左右；CRM+其AT-III结构与功能异常的类型较多，现已报道近10种结构

6、异常，如第42位精氨酸被半胱氨酸取代（即Arg47Cys47）。共同表现是对肝素的亲和力降低，从而对丝氨酸蛋白酶的灭活能力明显减弱。获得性AT-III缺乏：①AT-III合成降低，见于肝脏疾病、肝功能障碍，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝癌晚期，常与疾病严重度相关，可伴发血栓形成。②AT-III丢失增加，见于肾病综合征。③AT-III消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如心绞痛、心肌梗死、脑血管疾病、弥散性血管内凝血、外科手术后、口服避孕药、深部静脉血栓形成、肺梗死、妊高征等。伴弥散性血管内凝血的败血症，因粒细胞释放的蛋白酶，尤其是弹性蛋白酶有快速中和AT-II

7、I的作用。AT-III水平增高：在血友病A和血友病B、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，有报道AT-III水平增高。4操作规程出凝血6.11参考文献：1）主编王鸿利.止血与血栓检验技术.（第一版1992.6）上海科学技术出版社.2）主编李家增王鸿利韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上海科学技术出版社.3）主编邓家栋杨崇礼杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海科学技术出版社.4）主编邓家栋杨天楹杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985)天津出版社.5）中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程（第一版1991）.东南大学出版社.4