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1、黄瓜枯萎病菌遗传多样性的AFLP分析植物病理ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA41(3):301—304(2011)黄瓜枯萎病菌遗传多样性的AFLP分析张艳菊,陈霞,刘东,秦智伟,周秀艳,蒲子婧(东北农业大学,哈尔滨150030)AFLPanalysisofgeneticdiversityofFusariumoxysporumf.sp.cucumainumZHANGYan—Ju,CHENXia,LIUDong,QINZhi—Wei,ZHOUXiu-Yan,PUZi-jing(NortheastAgricul
2、—turalUniversity,Harbin150030,China)Abstract:ThegeneticdiversityofFusariumspecisesisolatedfromcucumberplantsshowingwiltdiseasefrom8citieswasdetectedbyamplifiedrestrictionfragmentpolymorphism(AFLP).Sixteencombinationsofprimerpairwereselectedfrom130combinationsanduse
3、dtoamplifythegenomicDNAof351Fusariumoxysporumisolates.Atotalofl16444bandswereobtainedand60579ofthemshowedpolymorphism.accountingfor52.0%.Thegeneticdistancesof351F.oxysporumisolateswereranged0.56-1.00basedonAFLPmarkers.averagedat0.78.Theresultsshowedthatthegeneticdi
4、versityamongtheF.oxysporumisolateswashigh.The351testedisolatescouldbeclassifiedinto5AFLPgroups,andmostoftheisolatesfromthesameareawereclusteredinthesamegroupbyusingtheUPGMAmethod.Keywords:cucumber;Fusariumoxysporum;AFLP;geneticdiversity文章编号:0412-0914(2011)03-0301—0
5、4黄瓜枯萎病是由半知菌亚门尖孢镰刀菌黄瓜专化型(FusariumoxyspoFumf.sp.cucurnainumOwen)侵染引起的一种土传病害,是影响黄瓜生产的最主要病害之一llJ.近年来随着分子生物学技术的迅速发展,国内外学者对于病原真菌的遗传多样性做了大量的研究,Wang等对影响黄瓜枯萎病菌AFLP技术体系的多种因素作了探讨,得到了1种适合于黄瓜枯萎病菌AFLP分析的优化体系;Duan等应用RAPD,ISSR和AFLP标记揭示出了西瓜枯萎病菌株在分子水平上的遗传多样性.AFLP技术(amplifiedfragment
6、lengthpolymor—phism)是由Zabeau发明,并由Vos发展起来的一种分子标记技术,它结合了RFLP稳定性和RAPD技术的简便高效性,同时又能克服RFLP带型少,收稿日期:基金项目:通讯作者:信息量小以及RAPD技术不稳定的缺点J.该技术以其重复性好,效率高的特点已被广泛应用于动物,植物研究,也成功地应用于植物病原真菌研究中,但在黄瓜枯萎病菌的研究中报道较少.因此,本研究采用AFLP分子标记方法对从哈尔滨,长春,沈阳,北京,保定,银川,西宁及杭州8个地区发病的黄瓜植株上分离得到的尖孢镰刀菌进行分析,旨在为更好
7、的了解镰刀菌的遗传多样性和演化关系,为黄瓜枯萎病菌致病性分化和抗病育种提供一定的理论基础.1材料与方法1.1供试菌株2008年,从哈尔滨,长春,沈阳,北京,保定,银2010-05-25:修回日期:2011-03-29国家科技部863项目(2006AA100108-4);"十一五"国家科技支撑计划项目(2006BA011)01A7);东北农业大学创新团队(CXT002-1-2);黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11551058)张艳菊,副教授,主要从事植物病原生物学研究;Tel:0451-55190827,Fax:0451-5
8、5190447,E-mail:ya.juzhang@yahoo.12oi/1.cn.植物病理川I,西宁及杭州8个城市采集黄瓜枯萎病标本.采用组织分离方法分离纯化,通过形态学和EF—l仅序列测定,共获得371株尖孢镰刀菌.选用黄瓜品种津春4号,采用胚根接种法接种后进行致病性测定,获得351株
