生物脱霉剂对黄曲霉毒素bl的作用研究

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1、生物脱霉剂对黄曲霉毒素Bl的作用研究1970-01-0108:00:00

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4、浏览次数：0张建梅李国军谷巍目前，全世界谷物饲料中污染霉菌毒素的比例高达25％以上，除了对畜牧生产造成经济损失外．部分霉菌毒素还具有致癌性或致畸性。从农业及健康角度出发，污染最严重，分布最广，危害最大的真菌毒素是黄曲霉毒素，天然污染的黄霉毒素以黄曲霉毒素B1(AFB1)为主，它是由曲霉菌属的黄曲霉和寄生曲霉等产生的次级代谢产物，主要污染玉米、花生、坚果等。对于轻度霉变的饲料与原料，可根据具体情况，采用不同的

5、方法进行脱毒处理，脱毒方法一般有物理脱毒法、化学脱毒法、酶解法、吸附法(陈雪峰等，2007)。生物脱霉剂安全无副作用，通过某些微生物的生物转化作用．能破坏霉菌毒素的化学结构或降低霉菌毒素的毒性，受到广泛关注。大量的研究表明，乳酸菌可以控制其他微生物的生长，抑制腐败菌和病原微生物的生长。目前，大多研究只是局限在实验室的条件下，对于乳酸菌类制剂在动物体内产生的防霉、脱毒效果的研究还鲜见报道。本试验将体外试验和体内试验结合起来，检测生物脱霉剂对黄曲霉毒素AFB1的脱霉效果．将生物脱毒和物理吸附脱毒结合起来，为霉变

6、饲料脱毒剂的开发提供技术支持。1材料与方法1．1 试验材料生物脱霉剂．主要成分为活性嗜酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌细胞壁及水合铝硅酸盐组成。1．2 主要试验仪器与设备 MultiskanMK3酶标仪，AFBl检测试剂盒(北京市营养源生物研究所)．强饲设备。1.3试验动物与分组选用60只体重相近、健康的40日龄肉鸡作为试验动物，随机分为5组，每组3个重复，每个重复4只鸡。待测玉米：霉变玉米于60℃烘干，粉碎过40目筛，准确称取50g分装封存于塑料袋中，置4℃冰箱中保存备用。1．4试验方法1．4．1 生物脱霉剂体外吸附

7、AFBl试验方法 取一定量的生物脱霉剂0．00(空白对照组)、0．25、0．50、0．75、1．00mg加入5mL无菌生理盐水，生物脱霉剂浓度分别为0．00‰(空白对照组)，0．50‰、1．00‰、l．50‰、2．00‰，摇匀，加入l00μL黄曲霉毒素Bl苯一乙腈溶液(AFBl浓度为100μg，mL)。混合液在37℃下，180r／min培养lh，4°C以10000r／min离心l0min．将没有结合的霉菌毒素(仍在溶液中)与结合型霉菌毒素(在吸附剂中)分离，并向沉淀中加入5mL生理盐水并重复离心1次。弃上清

8、液．用试剂盒测定2次离心所得上清液中黄曲霉毒素B1的量。生物脱霉剂对黄曲霉毒素B1的吸附率的计算公式为：1．4．2全收粪试验检测生物脱霉剂体内脱毒效果试验分为预试期、正试期以及体况恢复期3个阶段，正试期包括禁食排空、强饲和粪尿排泄物收集3个过程，其进程见表1。强饲后立即装好集粪瓶．以重复组为单位收集48h的排泄物，1～2h收集l次，排泄物取出后于60℃烘干，室内回潮24h，称重，作为每个重复组鸡的平均风干排泄物总量．粉碎，过40目筛，混合均匀后装入取样袋内封存。按照GB样品脂肪含量≤3％的AFB1提取方法(

9、GB／T5009．22—1996，1998)进行提取。AFBl的含量使用AFB1检测试剂盒(北京市营养源生物研究所)测定，操作方法依照说明书。2结果与讨论2．1 生物脱霉剂体外吸附黄曲霉毒素B1的效果由表2可以看出，在霉变饲料中加人生物脱霉剂后，各试验组中的黄曲霉毒素B1均被不同程度地吸附．生物脱霉剂添加量为O．50‰、1．00‰、l．50‰、2．00％。的4个试验组对AFB．的吸附率分别为59．69％、82．22％、98．05％和≥99．75％，其中添加2．00‰的生物脱霉剂组对黄曲霉毒素B1的吸附率在9

10、9．75％以上，饲料中的黄曲霉毒素基本上已经被完全吸附。而添加l．50‰的生物脱霉剂组对黄曲霉毒素B1的吸附率高达98．05％，脱霉效果非常显著。Peltonen等(2001)将乳酸菌和AFB1在37℃培养24h，用HPLC测定AFBl的量，结果显示有两株Lactobacillusamylovorus和一株LactobaciUusFhoJnlT,Osll8可以去除50％以上的AFB1另外，李志刚等(2003)研究表明。乳酸菌结合黄曲霉毒素B1的强度在4％～50％，其中干酪乳杆菌干酪亚种CGMCCll539吸

11、附黄曲霉毒素B1能力最强。而生物脱霉剂中的乳酸菌细胞壁对AFB1也具有很强的吸附能力。Haskard等(2001)系统研究了12株乳酸菌，其中对AFBl的结合能力最强为78．9％．经过加热处理后的死细胞对AFB1的结合能力增强，可以吸附84．1％的AFB1。他们推测死细胞也能大量结合AFB1，并且经过加热、酸化处理的失活细胞由于细胞壁表面的肽聚糖层交链减弱．使得孔径增大．其去除AFB1的能力强于活细胞。由于生物脱