放线菌的形态观察

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1、微生物学实验报告——放线菌的形态观察生命科学学院09级1班安明玉（200900140001）同组者：陈汶灿、陈肖然、程彬、高琳璐、秦瑶实验六、放线菌的形态观察一、实验目的1.掌握放线菌形态观察的基本方法；2.了解放线菌的形态。二、实验原理放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体，菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子菌丝组成。紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝（简称“基丝”），基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝（简称“气丝”），并进一步分化产生孢子丝及孢子。有的放线菌只产生基丝而无气丝。为避免破环细胞及菌丝体形态，通常

2、采用插片法和玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。在插片法中，将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培养基交界处生长而附着在盖玻片上，取出盖玻片，可直接在显微镜下观察自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长期的放线菌形态进行观察。在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。三、实验材料1.菌种青色链霉菌（Streptomycesglaucus）；弗式链霉菌(Streptomycesfradiae)。2.培养基灭菌的高氏Ⅰ号琼脂。3.仪器和用具显微镜；酒精灯；载玻片；盖玻片；接种环

3、；镊子；培养皿四、实验操作1.接种无菌操作分别由青色链霉菌和弗式链霉菌培养基平面上挑取菌种，在高氏I号培养基上密集画线接种。2.插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45度角插入平板琼脂接种线上。3.培养将平板倒置，于28℃恒温箱中培养7天。4.镜检用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察。五、实验结果及分析图1.青色链霉菌图2.弗式链霉菌·菌种颜色形状表面青色链霉菌青色圆形略凸弗氏链霉菌暗黄圆形略凸表1.培养基中菌落形态观察类别形状明暗状况粗细状况基内菌丝直或折曲，有分枝较透明或粗或细气生菌丝直或折曲，有分枝色暗

4、多粗，膨大孢子丝螺旋形或轮生，无分枝色暗粗，膨大表2.显微镜下菌丝及孢子丝形态观察六、关键步骤及注意事项1.倒平板要厚一些，接种时划线要密。2.插片时要有一定角度并与划线垂直。3.观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，更换高倍镜观察。4.操作中勿碰撞有菌丝的表面，以免破坏菌丝形态。附录：高氏(Gause)Ⅰ号培养基可溶性淀粉4gKNO30.25gNaCl0.1gK2HPO40.1gMgSO40.1gFeSO40.002g琼脂5g水200mlPH7.2---7.4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至

5、200ml。121℃灭菌20min）。