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1、婴幼儿配方食品和乳粉中核苷酸的测定方法ⅥnⅣw.chinadairy.netzgrpgy@163.com中国乳品工业dq/ryINDUSTRY婴幼儿配方食品和乳粉中核苷酸的测定方法郝岩平,张秋梅,王象欣(东北农,3k大学,黑龙-2c省乳品工业技术开发中心,哈尔滨150086)摘要:采用碱性磷酸酶先将样品中的核苷酸酶解为核苷.然后用高效液相色谱法测定婴幼儿配方食品和乳粉中核苷酸总量.试样经水提取,通过调pH值沉淀蛋白质.样液中的核苷酸经碱性磷酸酶水解生成核苷,再通过快速加热的方式终止酶解反应,同时进一步去除杂质
2、,用磷酸二氢钾及甲醇作流动相,用普通C18色谱柱,采用梯度洗脱的模式对5种核苷进行有效分离.本方法回收率在92.4%-103.7%之间.相对标准差2.0%8.0%.核苷酸各组分定量限:CMP)~0.6mg/100g,UMP为0.7mg/100g,IMP+AMP为0.5mg/100g,GMP为0.4mg/100g(均为质量分数).该方法简便,快速,准确,完全能满足婴幼儿配方食品中核苷酸总量测定的要求.为核苷酸检测开辟了全新的途径.关键词:配方食品;乳粉:核苷酸;核苷;高效液相色谱中图分类号:TS252.7文献标
3、识码:A文章编号:1001—2230(2011)04-0048—05ResearchondeterminationofnucleotidesininfantformulafoodandmilkpowderHAoYan—pin,ZHANGQiu—mei,WANGXiang—xin(NortheastAgriculturalUniversity,HeilongjiangDairyIndustryTechnicalDevelopmentCenter,Harbin150086,China)Abstract:Wefir
4、stemployalkalinephosphatasetOhydrolyzenucleotidestOthecorrespondingnucleosidesandestablishamethodforwhichdetectsthetotalnucleotidesininfantformulafoodandmilkpowderusingHPLC.Thesampleisextractedbywater,andeliminatedofproteinbyadjustingpH.Thenthenucleotidesin
5、samplearedegradedintonucleosides.ThisenzymehasbeenheatdeactivatedinordertOstopreac—tionandremoveimpuritiesfurther.ThechromatographicseparationwasachievedusingaC18columnandagradientelutionwithamixtureoftWOsolvents.whicheffectivelyseparatefivekindsofnucleosid
6、es.Therangeofrecoveryratesofis92.4%103.7%andtherangeofrelativestandarddeviationsis2.0%一8.0%.Thedetectionlimitsforthesenucleotidesare:CMPO.6mg/100g,UMP0.7mg/100g,IMP+AMPO.5mg/100gandGMP0.4mg/100g.Conclusion:Themethodwhichoffersanewwaytodetectthenucleotidesis
7、simple,rapidandaccu—rateanditcancompletelymeetthedetectionoftotalnucleotidesininfantformulafoodandmilkpowder.Keywords:formulafood;milkpowder;nucleotides;nucleosides;HPLC0引言人乳中天然的核苷酸质量浓度很高,而牛乳中天然核苷酸质量浓度低.为了使牛乳更接近母乳许多企业在乳粉中添加核苷酸,现在在婴儿配方食品和奶粉中添加的核苷酸品种主要有以下5种:胞
8、嘧啶核苷酸,腺嘌呤核苷酸,尿嘧啶核苷酸,鸟嘌呤核苷酸和次黄嘌呤核苷酸.目前一些企业采用湿法工艺生产婴幼儿配方食品.在标准化工艺阶段添加核苷酸后.由于乳中本身含有一定量的磷酸酶会使核苷酸脱磷酸而变成核苷导致核苷酸结果偏低.又因核苷的生理作用与核苷酸近似.若只检测核苷酸,不能真实反映出产品中核苷酸的含量本研究用碱性磷酸酶先将样品中的核苷酸酶解为核苷.以核苷为测定目标物,建立了高效液相收稿日期:2010—
