第六章检疫性细菌病害

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1、第六章检疫性细菌病害植物检疫性病原细菌的检验方法梨火疫病FireBlight玉米细菌性枯萎病Stewart’sbacterialwiltofcorn柑橘黄龙病CitrusYellowshoot椰子致死黄化病CoconutLethalYellowing复习思考题植物病原细菌检疫检验技术直接检测：直观检验和生长检验间接检测活菌检测免疫吸附分离法噬菌体检验非活菌检测血清学检测1、活菌检测分离培养法：营养培养基、选择培养基或鉴别培养基分离纯化得到的细菌浓缩接种及离体叶检测：提取液浓缩接种感病植物，观测发病情

2、况。例如：浙江大学等在1％灭菌水琼脂中加75×10－6的苯并咪唑，做平板，加感病植物叶片，针刺＋摩擦接种，培养（光、温、湿度），短期获得症状。主要应用于水稻细菌性条斑病菌和小麦细菌性黑颖病菌的检测。2.免疫吸附分离法原理：接合血清学与平板分离技术，利用与抗原高度亲和性的抗体，来捕获目标细菌，样本中其他细菌均被冲洗掉，再将目标细菌转移或释放到培养基上生长。方法：平皿免疫吸附评价测定法和免疫吸附稀释培养法平皿免疫吸附评价测定法简略流程如下：常用溶入丙酮的硝酸纤维素或指甲油作包被洗涤液使用包被缓冲液3.噬菌

3、体检验原理：噬菌体侵染细菌，裂解寄主细胞，在液体培养时，会使浑浊的细菌悬浮液变清，在固体平板上培养，则出现许多边缘整齐、透明光亮的噬菌斑。噬菌体具有专化性，利用此特点，可鉴别细菌的种类。4.非活菌检测非活菌检测的方法很多，下表是检测病原细菌常用的一些方法，前9种血清学方法，均属非活菌检测。它们既能用于病原鉴定，又能直接用于病种或病株，甚至是无症感染组织的检测。5.血清学检验原理：方法：酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫荧光抗体法免疫荧光抗体法：将荧光染料（异硫氢酸荧光黄或罗丹明）与抗体以化学方法接合

4、，再与抗体反应，形成有荧光标记的抗体—抗原复合物，在荧光显微镜下，可观察到黄绿色荧光。梨火疫病Fireblightofpear分布：1878年首先由burrill描述，在纽约发生，后由Erwin命名，是第一个被确定的植物细菌病害。主要分布于北美洲于西北欧，中欧、地中海、东南欧及大洋州和亚洲也有分布。大约40多个国家。梨火疫病的地理分布寄主：梨火疫病菌寄主范围很广，能为害梨、苹果、山楂、木旬子、李等４０多个属220多种植物，大部分属蔷薇科Pomoideae亚科。危害性：仁果类果树的一种毁灭性病害。一棵多

5、年生的梨和苹果树发病后可在几星期内死亡症状：侵害花、果实、枝条和叶片。花:侵染后变深褐色，枯萎。叶片:从叶缘沿叶脉扩展，先呈水浸状，后黑褐色。嫩稍:先水浸状，后褐色至黑色，向下弯曲，呈鱼钩状。果实：病部褐色凹陷，扩展到全果，潮湿时病部生粘稠的细菌溢，初乳白色，后红褐色。病枝:叶片凋萎，幼果僵化，但病叶病果不脱落，远望似火烧状，故称火疫病。伤口：初期水浸状，后下陷，呈溃疡斑，病健交界处产生龟裂纹，韧皮部红褐色，有黏液状菌脓。严重时，病害从嫩稍很快扩展到枝条、主干，直至根部，全株死亡。Advancedfi

6、reblightonfruit-notebacterialoozeonfruit.Fireblightinnurserystock主要鉴定特征：梨火疫病最典型的症状是花、果实和叶片受火疫病菌侵害后，很快变黑褐色枯萎，犹如火烧一般，但仍挂在树上不落，故此得名。目前国际上将其症状据受侵害的部位，分成５个阶段。（1）花枯萎：侵染开放的花引起花枯萎。一般发生于早春，病菌直接从花器侵入，初为水渍状斑，花基部或花柄暗色，不久萎蔫。病菌可扩展至花梗及花簇中其它的花；在温暧潮湿条件下，花梗上有菌脓渗出。随着枯萎发展，

7、花梗、花等变褐至黑褐色，条件适宜时可继续侵染杀死小枝并形成小溃疡斑。（2）溃疡枯萎：是指前一季越冬溃疡边缘的病菌重新复活的结果。初症是在复活的溃疡附近的健康树皮组织上出现窄的水渍状区，几天后，树皮内部组织出现褐色条斑，随后病菌侵入附近繁殖枝内部并引起萎蔫死亡。这些枝条特别是嫩枝与下面谈及的枝枯萎有明显区别，即在萎蔫之前枝尖芽褪色（黄至桔黄色）。（3）枝枯萎：细菌直接侵入前1～3叶的枝尖，然后杀死整个枝条及支持枝。初症是枝尖萎蔫，但萎蔫前不褪色，象拐杖状。条件适宜时，几天内可移动15～30cm，造成整枝

8、死亡，病枝、枝皮、叶通常变黑。潮湿时，枝条上出现菌脓。后期，终芽前出现的枝枯萎一般不会萎蔫，且仅在枝最上部出现坏死。随着病菌不断深入，并侵染主干，皮层收缩，下陷，形成溃疡斑。（4）病菌亦可直接从气孔、水孔等自然孔口或蕾苞，或由风引起的伤口侵入叶片，初叶边坏死，并向中脉、中柄、茎扩展，后变黑，通常有菌脓。（5）损伤枯萎和砧木枯萎：这二种比较特殊，前者主要是由于晚霜、冰雹或大风损伤引起，如果实很容易引起果实枯萎。后者仅限于高感品种EMAL-26、EMLA-9