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1、不同炮制方法对广西莪术质量影响的研究作者:覃葆,曾春晖,荣玲芝,谢旭玲【摘要】目的研究不同炮制方法对广西莪术的质量影响。方法比较生品、鲜药醋煮品、醋煮品、醋炙品挥发油含量;急性毒性实验(MTD);抑菌实验测定对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型溶血性链球菌最低抑菌浓度(MIC)。结果挥发油含量高低为醋煮品>鲜药醋煮品>生品>醋炙品;MTD结果显示炮制前后的毒性均较低,相当于60kg人临床日用量1000倍;炮制前后均有较强的抑菌作用。结论不同炮制方法及原产地加工均对广西莪术的质量有一定影响。【关键词】广西莪术;炮制;挥发油;急性毒性实验;最低抑菌浓度莪术为姜科植物蓬莪术Crc
2、umaphaeocaulisVal.、广西莪术CurumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang或者温郁金CurcumawenyujinY.H.ChenetC.Ling的干燥块茎。广西莪术主产于广西、云南,是广西的地道药材。近年来国内外药理学研究及临床研究发现莪术挥发油具有调节免疫、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗病毒等多种作用,因而备受关注。《本草纲目》云:“今人多以醋炒或煮熟入药,取其引入血分也。”11莪术的现代炮制方法主要以醋煮、醋炙为主。本文通过比较不同炮制方法对广西莪术挥发油等化学成分的影响及急性毒性实验(MTD)、体外抑菌实验等研究,为进一步探讨炮制原理、选择最佳
3、炮制工艺及饮片质量标准的制定提供参考。 1材料 1.1药材与试剂药品采自广西灵山县,经广西中医学院韦松基教授鉴定,为姜科植物广西莪术CurcumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang的根茎鲜品。营养琼脂(国药集团化学试剂有限公司,批号20080129)。 1.2仪器挥发油提取器(上海申立玻璃仪器有限公司);无菌净化工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司);电热恒温培养箱(上海医疗器械七厂);压力蒸气灭菌器(上海医用核子仪器厂);电热蒸馏水器(北京市医疗设备厂);电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂)。 1.3动物清洁级体重18~22g小鼠,雌雄各半,购
4、于广西中医学院动物实验中心。 1.4菌种及培养基金黄色葡萄球菌(26001)、大肠杆菌(ATCC25922)、乙型溶血性链球菌(32210)均购自中国药品生物制品检定所。实验菌种经血平板培养分离16~2411h后,挑选数个菌落置于生理盐水管中,校正浓度至0.5麦氏标准。 2方法与结果 2.1挥发油的含量测定 2.1.1样品的制备 生品:取干净的鲜品莪术,置煮制容器内,加水浸没药面,煮至内无白芯时取出,干燥(此为原产地加工常用方法)。分成两部分,一部分为生品原药材,另一部分大小分档,洗净,水浸润透,切薄片,干燥,筛去碎屑作为生品(饮片)。 鲜药醋煮品:取干净的鲜品莪术,置煮制容
5、器内,加入定量的米醋与适量水浸没药面,煮至醋液被吸尽,内无白芯时,取出,稍晾,切薄片,干燥,筛去碎屑。每100kg莪术用米醋20kg。 醋煮品:取生品原药材置煮制容器内,加米醋及适量水浸没,用文火煮至醋汁被吸尽,内无白芯时,取出,稍晾,切薄片,干燥。每100kg莪术用米醋20kg。11 醋炙品:取生品(饮片),加定量米醋拌匀,稍闷润,待醋被吸尽后,置炒制容器内,用文火加热,炒至微黄色,略带焦斑时,取出,放凉。每100kg莪术用米醋20kg。 2.1.2测定方法分别取上述样品粉碎,过2号筛;称取各100g,按《中国药典》2005年版Ⅰ部附录挥发油测定法操作。 2.1.3各样品挥发油
6、含量测定结果结果见表1。表1广西莪术不同炮制方法挥发油含量 2.2急性毒性实验 2.2.1药液的制备分别取生品、醋煮品、醋炙品加水10倍,浸泡30min,煮沸1h,过滤,再加水10倍煮沸1h,过滤,合并滤液,水浴浓缩至4g/ml,入冰箱保鲜备用。 2.2.2预实验取清洁级体重18~22g小鼠30只,雌雄各半,禁食不禁水12h,分为3组,用生品、醋煮品、醋炙品水煎浓缩液(4g/ml),最大剂量(0.4ml/10g)1次灌胃,连续观察7d,记录期间小鼠死亡数和一般情况,若死亡数≥30%,则测定半数致死量(LD50),结果各组小鼠无一死亡,故测不出LD50。改为测定最大耐受量(MTD)。
7、 2.2.3MTD测定取清洁级体重18~2211g小鼠60只,禁食不禁水12h,根据性别、体重分层随机分成3组,雌雄各半。同上灌胃,1次给药,连续观察14d,详细记录动物反应情况和死亡情况。 2.2.4实验结果各组给药后均出现自主活动减少、静卧不动、尾部静脉渐发黑,15min后开始活动,进食。2h后生品和醋煮品多数小鼠活动恢复正常,整个过程中没有出现惊厥、抽搐。醋炙品个别发生惊厥、抽搐、扭体反应等,显示毒性稍大迹象,但由于已经是