中药穴位敷贴疗法对哮喘大鼠炎症反应的影响

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1、中药穴位敷贴疗法对哮喘大鼠炎症反应的影响【摘要】【目的】观察穴位敷贴疗法对哮喘大鼠炎症反应的影响。【方法】选用Wistar大鼠33只随机分为正常组、模型组、地塞米松组及穴位贴药组；模型组以卵蛋白致敏并诱发哮喘模型，腹腔注射生理盐水，同时背部给予空白对照药物敷贴；地塞米松组在哮喘大鼠雾化后予以腹腔注射1mg/kg地塞米松，同时在背部备皮予以空白对照药物敷贴；穴位贴药组在哮喘大鼠雾化后予以腹腔注射1mg/kg的生理盐水，同时在背部备皮予以治疗药物敷贴，穴位取大椎、肺俞、脾俞、肾俞穴。疗程结束24h内取各组大鼠肺组织观察其炎症情况，并取外周血采用酶联免疫吸

2、附（ELISA）法比较各组大鼠白细胞介素4（IL4）、干扰素γ（IFNγ）的含量。【结果】模型组大鼠与正常组比较，肺组织中可见嗜酸性粒细胞（EOS）、淋巴细胞及巨噬细胞浸润增加（P＜0.01）。地塞米松组与模型组比较嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞浸润显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。穴位贴药组对嗜酸性粒细胞浸润也有显著抑制作用（P＜0.01），但对于淋巴细胞及巨噬细胞浸润无显著抑制作用（P＞0.05）。模型组大鼠外周血IL4含量较正常组显著增加（P＜0.01），而IFNγ含量较正常组显著降低（P＜0.01），地塞米松组及穴位贴药组中大

3、鼠外周血IL4含量较模型组降低（P＜0.01），但地塞米松组大鼠外周血IFNγ含量与模型组比较无显著性差异（P＞0.05），而穴位贴药组大鼠外周血IFNγ10含量显著高于模型组（P＜0.01），与正常组比较无显著性差异（P＞0.05）。【结论】中药穴位敷贴治疗哮喘的作用可能与其能抑制肺组织嗜酸性粒细胞浸润，降低外周血IL4含量，升高IFNγ含量有关。【关键词】哮喘/穴位疗法；肺组织/病理学；疾病模型，动物；穴，大椎；穴，肺俞；穴，脾俞；穴，肾俞中药穴位敷贴疗法是中医外治法中一种常用的治疗方法，它是通过药物刺激人体局部穴位并借助药物的药力和热

4、力而达到温通经络、行气化痰、散寒除湿的作用。临床上多用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎等慢性呼吸系统疾病［1］。本研究观察了穴位敷贴疗法对支气管哮喘模型大鼠外周血白细胞介素4（IL4）、干扰素γ（IFNγ）含量以及肺组织中嗜酸性粒细胞（EOS）、淋巴细胞及巨噬细胞浸润的影响，现报道如下。1材料与方法1.1动物SPF级Wistar大鼠，雄性，共33只，体质量200～250g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：0016837。1.2试剂及仪器10卵蛋白(OVA)购于美国Sigma公司；地塞米松购于郑州卓峰制药厂（批号：0604213）；穴位贴

5、药制剂（批号：20060815）及空白对照药物制剂（批号：20060829）均由广东省中医药研究所制备并提供；酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒由深圳海辉试剂公司提供；超声雾化器为汕头市粤华医疗器械厂产品；CH2型显微镜为日本OLYMPUS产品；800型酶标仪为美国宝特公司产品。1.3哮喘模型复制［2］造模大鼠于第1天及第7天腹腔注射100g/LOVA1mL致敏，2周后将大鼠放入雾化箱中，用20g/L卵蛋白25mL，在最大雾化程度和最大风速的条件下雾化40min，每天1次，连续雾化2周，在雾化期间及结束后观察大鼠反应，以出现烦躁不安，呼吸频率加快，节

6、律性点头运动为阳性反应，提示造模成功。1.4药物制备治疗药物：取胡椒、白芥子、细辛、白芷、半枫荷各等份磨至100目细粉后混合。取生姜10kg，温度50℃，压力14.4mPa，超临界CO2萃取，时间2h，得姜油约90mL，备用。另取7kg生姜，榨汁，得生姜汁，加热煮沸10min，冷却后冰箱保存备用。取药粉加入适量姜油混合，并加蒸馏水调节至合适的软硬度，分装玻璃瓶中，经灭菌、检查、贴签,成品呈棕黄色，于低温(4℃～10℃)状态下保存。用时以特定容器压成直径1.2cm、厚0.25cm的圆柱形小药饼，蘸姜汁用无菌敷料固定在穴位上。空白对照药物：取红米、黑米、

7、玉米干炒处理，分别粉碎成100目细粉后混合,拌入姜油(取生姜3kg，制备方法同上)，加蒸馏水调节至合适的软硬度,分装玻璃瓶中,经灭菌、检查、贴签，成品呈棕黄色。保存及用法同治疗药物。101.5实验分组将实验大鼠随机分为4组：正常组用生理盐水代替OVA致敏与诱发；模型组造模雾化后腹腔注射生理盐水，同时背部给予空白对照药物敷贴；地塞米松组造模2周后开始腹腔注射1mg/kg地塞米松，同时在背部备皮予以空白对照药物敷贴；穴位贴药组造模2周后开始腹腔注射1mg/kg的生理盐水，同时在背部备皮予以治疗药物敷贴。贴药的部位位于大鼠下颈项部至上背部处(相当于人体的大

8、椎、肺俞、脾俞、肾俞穴，取穴方法按照《实验针灸学》［3］)，保留4h后除去，每日1次，7次为1疗程，治疗结束