盐酸小檗碱对草鱼补体c作用机理及药代动力学-毕业论文

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1、毕业论文(设计)题目学院学院专业学生姓名学号年级级指导教师 毕业教务处制表毕业盐酸小檗碱对草鱼补体C3作用机理及药代动力学研究-毕业论文一、毕业论文说明本团队专注于毕业论文写作与辅导服务,擅长案例分析、编程仿真、图表绘制、理论分析等,论文写作300起,具体价格信息联系二、毕业论文范文参考如下毕业论文摘要:近年来,免疫学在水产上的研究已成为研究水产动物病害的热点之一,免疫机制的研究为合理有效地防治各类动物疾病提供依据。传统的预防与治疗水产动物疾病以使用抗生素为主,但不良反应多,副作用显著。然而人们发现越来越多的中药不仅具有良好的抗菌和提供免疫力的作用而且副作用少。

2、黄连具有清热解毒及杀菌的功效,其主要化学成分是生物碱,例如,小檗碱、黄连碱、巴马汀、表小檗碱、药根碱,其中小檗碱含量约6%-10%。已有文献报道黄连可以提高鱼类的免疫力,因此,我们对黄连生物碱进行提取与分离并研究小檗碱对草鱼补体C3作用的机理研究,阐明黄连提高水产类动物免疫力的物质基础,为黄连在水产上的应用与开发提供理论依据本论文的主要内容与结果1、黄连中生物碱的提取分离与鉴定运用高速逆流色谱法(HSCCC),以氯仿-甲醇-0.2mol/L盐酸作为溶剂体系从黄连的生物碱粗提物中进一步分离制备了4种生物碱类化合物,通过1HNMR和13CNMR核磁波谱技术并结合相关

3、文献报道确定4个化合物分别为小檗碱、巴马汀、表小檗碱及黄连碱。与传统的分离方法相比,高速逆流色谱法(HSCCC)具有分离周期短,溶剂用量少,操作简便快捷,在中药成分分离上具有独特的优势。2、盐酸小檗碱对感染嗜水气单胞菌草鱼存活率的影响实验取体重均匀且健康的草鱼150条,随机分为5组:对照组(NC)、模型组(M)、盐酸小檗碱0.06%组(BBR-L)、盐酸小檗碱0.12%组(BBR-M)、盐酸小檗碱0.24%组(BBR-H)。实验组投喂相应的浓度的盐酸小檗碱饲料,对照组与模型组投喂基础饲料,每天投喂饲料10g/尾,连续投喂14天后,模型组和实验组腹腔注射0.2mL

4、嗜水气单胞菌(108cfu/mL),对照组注射等量的无菌生理盐水。记录草鱼死亡情况,实验重复三次,取三次实验的平均值。结果显示给药组草鱼的存活率分别为50%、70%、73.3%,模型组(M)存活率仅为10%,对照组没有死亡情况。经统计分析,各个药物浓度试验组草鱼存活率均显著提高(p0.01)。表明盐酸小檗碱能提高草鱼的免疫力,且与剂量相关。3、盐酸小檗碱对草鱼非特异性免疫指标的影响本实验取80条体型大小相似的草鱼随机分为4组,每组20条,分别为对照组(nc)、0.06%、0.12%、0.24%盐酸小檗碱给药组,给药组投喂相应的浓度的盐酸小檗碱饲料,对照组投喂基础

5、饲料。各组每天投喂饲料10g/尾,观察草鱼进食和活动情况,在第7天和第14天尾静脉取血,测定草鱼免疫指标补体c3含量、溶菌酶活性、呼吸爆发活性。实验数据使用spss16.0统计软件进行分析,结果以平均值±标准差表示,采用单因素方差分析及lsd对样品进行多重比较。实验结果表明:在第七天,0.12%和0.24%盐酸小檗碱给药组血清中补体c3含量与对照组相比显著性提高(p0.05),溶菌酶活性和呼吸爆发活性均有所上升,但未见显著性差异(p0.05);第14天,各浓度给药组的草鱼补体c3含量均表现显著性提高(p0.05);溶菌酶活性升高,但均未达显著差异(p0.05);

6、0.12%、0.24%盐酸小檗碱给药组呼吸爆发活性升高且具有显著性差异(p0.05),0.06%盐酸小檗碱给药组活性虽有升高,但未见显著差异(p0.05)。表明盐酸小檗碱能提高草鱼的非特异性免疫功能。4、盐酸小檗碱对草鱼补体c3mrna表达的影响随机将80条健康且体型大小相似的草鱼分为4组,分别为对照组、0.06%、0.12%、0.24%盐酸小檗碱给药组。试验组投喂相应的浓度的盐酸小檗碱饲料,对照组投喂基础饲料,每天投喂饲料10g/尾。观察草鱼进食情况和活动情况,喂养14天后,麻醉后杀死,取其肝脏,提取草鱼肝脏补体c3mrna,利用primer5引物设计软件设计

7、引物,采用10μl逆转录反应体系合成cdna,用核酸定量仪测定rna浓度。实验数据使用spss16.0统计软件进行分析,结果以平均值±标准差表示,采用单因素方差分析及lsd对样品进行多重比较。pcr结果显示,0.06%、0.12%、0.24%盐酸小檗碱给药组补体c3mrna表达均上调,与对照组比较,各给药组补体c3mrna表达上调比例分别为20.57%、27.35%、26.49%,具有显著性差异(p0.05),上调的趋势与血清中补体c3的结果类似。研究表明盐酸小檗碱能上调草鱼补体c3mrna的表达。5、补体消耗试验草鱼空白血清中加入盐酸小檗碱配制成2mg/l、5

8、mg/l、10mg/l、

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