有机相酶法不对称水解乳酸乙酯

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1、有机相酶法不对称水解乳酸乙酯反映类型：酶催化的水解反应方程简化：D-乳酸乙酯→L-乳酸+乙醇若考虑酸醇抑制及D-乳酸乙酯对酶活性中心的竞争，并满足假定：与底物浓度相比,酶的浓度很小，所以复合物的生成不会明显改变底物的浓度；乳酸和乳酸乙酯在反应过程不变质。利用平衡假设可以得到（1）式V=参数求取：由于带酸醇抑制的酶拆分动力学方程中有6个自变量,包含有11个未知参数,因此实验中选取不同的变量作为自变量,通过6种不同的体系,分别建立各自变量和反应初始速率的关系。利用Lineweaver-Burk双倒数法将上式两边取倒数整理可得：(1)水的浓度为50gL-1,以纯L-乳酸乙酯浓度

2、为自变量建立反应体系，60℃、200r·min-1条件下反应得到水解曲线(见图1)。由式(2)作图得图2。（2）图1不同L-乳酸乙酯浓度的水解曲线图2L-乳酸乙酯浓度为变量双倒数曲线(2)乳酸乙酯(消旋体)浓度为200g·L-1，以水的浓度为自变量建立反应体系，60℃、200r·min-1条件下得到水解曲线(见图3)。由式(3)作图得图4。（3）图3不同水浓度的水解曲线图4水浓度为变量双倒数曲线(3)纯L-乳酸乙酯为反应底物,固定其浓度为200g·L-1,水浓度为50g·L-1。以乙醇浓度为自变量建立反应体系,在60℃、200r·min-1条件下反应得到水解曲线(见图5)

3、。由式(4)作图得图6。（4）图5不同乙醇浓度的水解曲线图6乙醇浓度为变量曲线(4)纯L-乳酸乙酯为底物，固定其浓度为200gL-1,并加入消旋乳酸50gL-1,以水的浓度为自变量建立反应体系,60℃、200rmin-1条件下得到水解曲线(图7)。由式(5)作图得图8。（5）图7不同水浓度的水解曲线图8加乳酸水为变量双倒数曲线(5)以消旋乳酸乙酯为底物,并固定其浓度为200gL-1,在体系中加入消旋乳酸,水浓度为50gL-1,以L-乳酸浓度为自变量建立反应体系,在60℃、200rmin-1条件下反应得到水解曲线(图9)。由式(6)作图得图10。（6）图9不同乳酸浓度的水解

4、曲线图10L-乳酸浓度为自变量曲线(6)以消旋乳酸乙酯为底物,在体系中加纯L-乳酸使其浓度为50gL-1,水浓度50gL-1,以L-乳酸乙酯浓度为自变量建立反应体系,在60℃、200rmin-1条件下反应得到水解曲线(见图11)。由式(7)作图得图12。（7）图11不同乳酸乙酯浓度的水解曲线图12乳酸乙酯浓度为变量双倒数曲线数据拟合：通过以上6组实验结果,利用origin对数据进行线性处理,可得动力学模型为