生物显微技术实验指导

生物显微技术实验指导

ID:16464724

大小:52.50 KB

页数:4页

时间:2018-08-10

生物显微技术实验指导_第1页
生物显微技术实验指导_第2页
生物显微技术实验指导_第3页
生物显微技术实验指导_第4页
资源描述:

《生物显微技术实验指导》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库

1、实验一石蜡切片技术——取材、包埋一、实验目的掌握制作石蜡切片中取材、包埋的基本操作技术。二、实验用品1、实验材料:鱼2、实验试剂:10%甲醛溶液(40%甲醛10ml,蒸馏水90ml)、50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精、二甲苯、石蜡。3、实验器具:解剖器,双面刀片,小瓶,牛皮纸、电热恒温箱、脱水机、包埋机。三、实验步骤1、取材:用任何杀生的方法把鱼杀死,将腹腔打开,切取0.5cm3左右大小的肝脏、肠等组织。2、固定:将切好的组织直接投入10%甲醛固定液中,固定24h。3、脱水:50%酒精→70%

2、酒精→80%酒精→90%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。每级1-2h。70%酒精处可长期保存。4、透明:1/2二甲苯+1/2100%酒精(1-2h)→纯二甲苯(1h)→纯二甲苯(1h)5、浸蜡:石蜡先置于60℃的温箱中,倒入含二甲苯及材料的小瓶中置于37℃温箱中,放置2-4小时。6、包埋:先提升恒温箱的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,

3、也可在凉水盆中放置过夜。四、作业分析总结石蜡切片技术中固定和包埋的操作注意事项有哪些?附:折纸盒按下列顺序折叠:(1)折AA'及BB';(2)折CC'及DD';(3)折CE'与AE'、向外夹出EE'。同样折出FF',GG'及HH';(4)使CE'E与E'IE两三角形相叠,并沿E'C和EI重叠的折痕向后转折。同样折其余三只角;(5)折RIJF向外,同样折出GKLH,即折成所需的纸盒。实验二石蜡切片技术——切片、贴片一、实验目的掌握制作石蜡切片中切片、贴片的基本操作技术。二、实验用品:1.实验试剂:95%酒精、100%酒精、二甲苯、明胶

4、液、蒸馏水。2.实验器具:切片机、展片机、烤片机、载玻片、盖玻片、酒精灯、毛笔、牛皮纸、刀片、解剖刀、台木。三、实验步骤:1.修块、粘块、整修的步骤:(1)选取所要切片的材料,从包埋的石蜡块上用单面刀片切割下来,注意不可损伤包埋的组织。(2)确定切面的方位,用刀片将石蜡块的四面作初步的整修。保证材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。(3)点燃酒精灯,并准备一把旧的解剖刀。(4)左手大拇指与食指间持整修好的石蜡块,材料向上用其余三指夹住台木。此时将解剖刀在酒精灯上加温后,即放在台木与石蜡块之间,因解剖刀已加温,遇上两面

5、的石蜡都会融化,可立即将解剖刀抽出,石蜡块迅速压在台木上。(5)再将解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,放在刚才固定的石蜡四周。此时,解剖刀再加温,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平。使石蜡块牢固地粘在台木上。(6)修石蜡块上下面平行,使切成的蜡带呈一直线,不弯曲。每个切片中组织的距离接近。2.切片的方法:(1)准备下列用具:毛笔、牛皮纸(2)将已固着和整修好的石蜡块和台木装在切片机的夹物部分.(3)安装切片刀,将刀片夹在刀夹上,并调整好刀的角度。刀的斜度,非常重要,最好先切除的蜡块试刀,以确定刀的斜度,一经调度适合后,就不要随便变动,以免每次试刀的

6、麻烦。(4)移动刀片固定器,使夹刀部与夹物部之间的距离调整好,以石蜡块的表面刚贴近刀口为度,在旋紧切片固定器的螺旋。(5)调整石蜡块与刀口之间的角度与位置。修整蜡块,将刀片移近蜡块,使小蜡块的下边与刀锋平行,如不平行,可调夹物部上的螺旋。然后把它固定,再转下蜡块.呈矩形才行。只有平整的蜡块,才能切出平整的蜡带。(6)最后根据需要,调整控制切片厚度的机制。调度后,把它固定下来。上述四步骤完成后,就可进行切片,(7)开始切片。右手握旋转轮的手柄,摇动一转就可切下一片,切下的蜡片粘在刀口上,待第二片切下时粘在一起,所以连续摇动就可将切下的

7、蜡片连成一条蜡带。这时左手就可持毛笔将蜡带提起,边摇边移动蜡带。转速为每分钟40-50为宜。(8)切成的蜡带到20-30厘米时,即以右手用另一只毛笔轻轻将蜡带挑起,平放在牛皮纸上。靠刀的一面较光滑,应向下,较皱的一面向上。(9)切下的蜡片是否良好,此时应先行检查。(10)切片工作结束后,仍将刀片用具擦拭干净。3.贴片:贴附牢固,在染色时不易脱落;使皱褶的蜡片伸展平整。用具:载玻片、粘片剂、解剖刀、蒸馏水、展片机及烤片机。材料切成薄片后,须将切片粘在玻璃片上,加热展开,这叫粘片。所用载玻片必须清洁才能使用。粘片时,需把胶液置簿玻片上,

8、再取切片,浮置胶液上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30~40℃约1小时即干。(1)将展片机温度调整到35℃,保持恒定。(2)在

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。