金属硫蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.doc

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1、金属硫蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义作者：霍韶军，张瑞刚，董海燕，田云霄，张建华，高社全，张振江【关键词】膀胱癌；金属硫蛋白；免疫组织化学　　ABSTRACT:ObjectiveTostudytheclinicalsignificanceofmetallothioneininbladdertransitionalcellcacinoma(BTCC).Methods72specimensofBTCCwereassessedbyimmunohistochemicalmethod(SPmethod).ResultsAmongthe72cas

2、es,thepositiverateofmetallothioneininGradeⅠ,GradeⅡandGradeⅢofBTCCwas34.8%,55.6%and92.8%,andwas64%ininitialBTCCand87.3%inrecurredBTCC.ConclusionMetallothioneinmaybeavaluablemarkerofdrugresistance,invasivebehaviorandrecurrenceinBTCC.　　KEYWORDS:bladdertransitionalcellcarcino

3、ma;metallothionein;immunohistochemically　　摘要：目的探讨金属硫蛋白表达在膀胱移行细胞癌治疗及预后方面的临床价值。方法采用免疫组织化学SP法对72例膀胱移行细胞癌标本进行金属硫蛋白染色，并结合临床进行分析。结果金属硫蛋白在膀胱移行细胞癌G1、G2与G3级的表达分别为34.8%、55.6%、92.8%。在初发及复发膀胱癌中的阳性表达率分别为64%、87.3%，统计分析金属硫蛋白在膀胱移行细胞癌不同的病理分级间以及复发与初发间的表达分别存在显著性差异。结论金属硫蛋白可作为膀胱癌复发、耐药及高度恶性的一个

4、潜在指标。　　关键词：膀胱癌；金属硫蛋白；免疫组织化学　　膀胱肿瘤在我国是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤。恶性肿瘤易复发、转移，对化疗药物易产生耐药性是治疗的难点，同样也是膀胱肿瘤的治疗难点。金属硫蛋白(Metallothionein,MT)与肿瘤的发生、生物学行为和预后密切相关。因此，我们应用免疫组织化学方法对金属硫蛋白在不同病理分级的膀胱移行细胞癌细胞中的表达情况进行了研究。　　1材料与方法　　1.1一般资料收集邯郸市中心医院病理科2002年9月至2004年3月间资料完整的膀胱移行细胞癌(bladdertransitionalcellc

5、acinoma,BTCC)手术存档的石蜡块标本72例。其中男性55例，女性17例。男女比例3.4∶1，年龄21-81岁，平均58.7岁。经尿道膀胱肿瘤电切术(transurethralresectionofbladdercancer,4TURBT)50例，膀胱部分切除术14例，膀胱全切除术8例。其中初发膀胱移行细胞癌39例，复发膀胱移行细胞癌33例。根据世界卫生组织(WHO)分类标准进行病理分级，其中G127例，G231例，G314例。所有石蜡块标本均作厚3μm连续组织切片备用，用外伤患者的膀胱黏膜作为正常对照组。　　1.2免疫组织化学方

6、法免疫组化采用链霉菌过氧化物酶法(SP法)，一抗鼠抗人金属硫蛋白单克隆抗体，克隆系E9，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。切片常规脱蜡至水，3%(体积分数)双氧水消除内源性过氧化物酶的活性，柠檬酸组织抗原修复液修复抗原，依次加入一抗、二抗、三抗及DAB显色剂，苏木素复染，中性树胶封片，正常对照组应用PBS液代替一抗，其余步骤相同。　　1.3结果判定细胞浆内或胞核内出现棕黄色颗粒为染色阳性细胞，对所有标本进行半定量评估。首先将切片置于低倍镜下(×40)观察，确认标记最强的区域。每张切片选择4个标记最强的区域在高倍镜下(×400)计数MT阳性

7、细胞百分数(MT阳性细胞数/计数细胞数×100%)，计算出平均数，分为无标记(-)、标记少于25%(+)、介于25%-50%()、大于50%()四个等级。采用PanasonicWVCP4601CH图象采集系统进行显微照相。　　1.4统计学处理采用SAS8.0统计软件包进行统计分析。MT的表达与膀胱移行细胞癌病理分级的关系及MT的表达与膀胱移行细胞初发癌、复发癌的关系均采用χ2检验。　　2结果　　MT阳性细胞染色表现为细胞浆内(有的包括细胞核)出现棕黄色颗粒，散在分布于肿瘤细胞内，接近于基底层的肿瘤细胞表达强度高于表层肿瘤细胞。同样在侵袭性

8、膀胱癌细胞中也发现类似的情况，越接近于深层的肿瘤细胞其表达强度越高于表层肿瘤细胞(见图1、图2)。　　图1－图2略　　72例膀胱移行细胞癌中，G131例中MT过表达(、)者8例(34.8%)；