关节软骨缺损修复和关节内出血对软骨影响的临床与实验研究

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1、河峙莲钭六虿}篙券F生{『小划分类ljI二：E二：：一博士研究生毕业论文关节软骨缺损修复和关节内出血对软骨影响的临床与实验研究研究生张继春导师陈百成教授擘、I；，二拨学院研究起J}二FI聊提交闩目l外科学第三临床医学院2003年3月一2004年12月2005年4月中文摘要关节软骨缺损修复和关节内出血对软骨影响的临床与实验研究摘要在骨关节炎病程中．典型的病理变化发生在关节软骨层中。病程初始为细胞外基质蛋白聚多糖的丧失和胶原纤维网架的紊乱，接着是细胞变性和凋亡。最初小的局灶病变，逐渐增加周长和深度，最终波及到整个关节软骨。虽然残留的软骨细胞代谢

2、活性增加，但损伤进程明显超过了合成作用。已进行大量的基础研究和临床试验试图加快关节软骨的组织愈合和成熟关节软骨微损伤的结构和功能的重建。这些病变通常是在许多关节疾病如骨关节炎(Osteoanllritis，0A)过程中产生的，还有大量的基因和代谢疾病，如肢端肥大症、Pa鼯t’s病、S“ckler综合征、血友病和刨伤引起的后果。关节软骨病变通常不能自身修复，在特定生物条件下仅能部分修复。关节软骨病变通常引起关节疼痛、僵硬和关节功能下降或紊乱和残疾。这些病变一般认为进一步可导致OA。为此人们试图修复软骨病变，包括对症治疗，这可减轻病人疼痛或可保

3、留关节功能和预防或至少明显减低导致关节障碍的病变进程。基于此本课题分三部分来对软骨缺损的修复以及出血对软骨的影响进行研究。l多聚糖生物材料修复大鼠软骨缺损的实验研究目的：在SD大鼠软骨缺损模型中，应用多种聚合体生物材料作为充填和修复关节软骨缺损，比较其大体和组织学观察结果，以得到适合的聚合体生物材料。方法：取SD大鼠100只，雌雄不限，体重250±209。分别编号标记后随机分为A组(自然修复组)、B组(透明质酸水凝胶组)、C组(藻酸钠海绵组)、D组(复合透明质酸海绵组)和E组(复合海绵组)，每组】8只。剩余10只取sD大鼠的剑突，经酶学解离

4、细胞法获取软骨细胞。在大鼠的股骨滑车上钻孔造成软骨损伤，比较其大体和组织学观察结果以及生物化学评估修复区的胶原含量。结果：通过透明质酸水凝胶完成修复的软骨与用复合透明质酸钠海绵和复合海绵软骨细胞修复软骨作比较，在大体外观上有一个相类似的表中文摘要面。与藻酸盐海绵组比较透明质酸水凝胶和复合海绵软骨细胞组得到的大体和组织学积分最高(分别是P

5、藻酸盐海绵明显地改善大体和组织学积分(分别P<0．05和P

6、l周、4周、8周取材，测定水、蛋白多糖以及胶原含量的改变，同时进行大体及普通光镜观察。结果(1)受出血影响，第l、4周含水率都显著增加(均为PO．05)。胶原含量在第l周低于对照组(P<0．05)，4ml组重于2ml组，第4、8周与对照组问均无明显差异(P>005)。浅层在第1周及第4周明显低于对照组(均P0．05)，第4周大于第l周(P

7、显著性差异(均P>0．05)，第4、8周均大于第1周(P<0．05)，第8周与第4周间无显著差异(P>O．05)。深层各组与对照组之间均无显著性差异(均P>0．05)。关节软骨色泽稍暗，表面粗糙，第1周最为明显。(2)HE染色结果：实验侧软骨表面不光滑，细胞排列欠整齐，细胞分裂相增多，可见软骨细胞簇聚，潮线变模糊。4ml侧比2ml侧变化明显。(3)II型胶原免疫组化染色：第l周，软骨表层染色稍变淡，软骨细胞周围浓染区染色无明显变化。第4周以后未见明显变化。(4)含水率的改变：①与空白对照组比较：第4周低于第1周(P<0．05)。中文摘要第8

8、周低于第4周(PO．05)。(5