蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响

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1、万方数据1993；90(17)：7951-5．8张红．锂的代谢平衡及糖代谢的关系[J]．国外医学·生理、病理科学与临床分册，1997；17(4)：3161．9NishimumM，YuG，LevesqueG．eta1．PresenilinmutationsassociatedwithAlzheimerdiseasecausedefectiveintraceUulartra侬ckingofbeta一蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响生国盔壬堂盘查!塑堡!!旦筮21鲞catenin，acomponentofthepresenilinproteincomplex[J]．Nature

2、Med。1999；5(2)：164-9．(2009-02-25收稿2009-07—12修回](编辑张铭)王浩张庆乐徐晓燕王晓丹高永峰高允生(泰山医学院，山东泰安271016)[摘要]目的观察蜂胶总黄酮对D，半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆的影响，并对其作用机制进行了探讨。方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖42d，制备衰老模型。通过小鼠学习记忆能力、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)水平的测定，评价蜂胶总黄酮的抗衰老作用。结果与空白对照组相比，D一半乳糖(150S／kg，8C，42d)使小鼠学习记忆能力降低，脑组

3、织中SOD、GSH—Px活性下降，MDA、LF含最增加，而蜂胶总黄酮30mg／kg、60ms／kg和90ms／ks三个剂量组对上述病理变化具有不同程度改善作用。结论蜂胶总黄酮能改善D一半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆功能障碍，其机制可能是抗氧化调宵自由基代谢。[关键词]蜂胶；黄酮；学习记忆；脂褐素；衰老[中图分类号】11961．1[文献标识码]A[文章编号】1005-9202(2009)22-2880-03蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干采集的蜂蜜，混入蜜蜂上颌腺分泌物和蜂蜡后加工制成的芳香味的胶状同体物质。蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分，其中主要是黄酮类化合物，研究发现蜂胶黄酮具

4、有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤、免疫调节、清除自由基等生物学活性¨’2’。而蜂胶黄酮对学习记忆的影响少见报道。本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对各种学习记忆障碍模型小鼠具有明显保护作用口J。本文在此基础上，采用超声法提取蜂胶总黄酮，观察了其对D一半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能的影响，并从抗氧化角度对其作用机制进行了初步探讨，以期为蜂胶的抗衰老作用提供实验依据。1材料与方法1．1材料1．1．1蜂胶原胶由山东省实验种蜂厂提供。参照文献(4]，超生法提取蜂胶总黄酮，临用前0．15％吐温80溶解，配成所需浓度备用。参照文献[5]，以芦丁为标准品，用比色法测定总黄酮含量。1．1．2

5、昆明种小鼠体重18～22g，由泰山医学院实验动物中心提供，合格证号：鲁动质字020103。1．1．3材料及仪器D一半乳糖，Amresco生产，卜海贝基生物技术有限公司分装，临用前用生理盐水配制合适浓度；超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、脂褐素(LF)试剂盒、考马斯亮蓝测定试剂盒，购自南京建成牛．物工程研究所；芦丁标准品，购自中国药品生物制品榆定所。KQ-600DB型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司生产；Y型迷宫刺激器，安徽省淮北正华生物仪器没备有限公司生产；紫外分光光度计，上海棱光技第一作者：壬浩(19

6、77一)，女，讲师，硕J：，主要从事神经药理学、中药药理学研究。术有限公司生产；RF-5301PC荧光分光光度计，Et本岛津生产。1．2方法1．2．1动物筛选、分组、给药及模型的制备旧。取2月龄昆明种小鼠放入Y．型迷宫箱中适应1～2min，给予适当电击，至其对3臂均探索进入为止，选择活跃，对电击反应较敏感的小鼠，过于敏感和迟钝小鼠被淘汰。筛选80只小鼠随机分为5组，每组16只(雌雄各半)，对照组，D．半乳糖衰老模型组，均灌胃等体积生理盐水，蜂胶总黄酮低、中、高浓度组，分别以30、60、90mr,／kg3个剂量进行灌胃，给药6W。灌胃同时除生理盐水对照组外，其余各组小鼠每只每

7、日颈背部皮下注射D一半乳糖150me,／kg1次，连续6W，制备小鼠衰老模型。末次给药后，进行Y型迷宫试验。1．2．2Y型迷宫试验"’采用Y型迷宫法，迷宫共分为三个互通的臂。实验测试时，以A为起步区，B为安全区，C为危险区。工作电压20～30V。小鼠在起步区受到电击后，一次性跑人安全区为正确，否则为错误，即为一次训练。下一次训练以B为起步区，c为安全区，A为危险区，依次往复。共训练33次，其中前3次作为小鼠适应环境不进入统计，记录后30次的错误次数，为学习成绩。24h后，用同样的方法测试，为记忆成绩。1．2．3脑组