解淀粉芽孢杆菌b9601y2悬浮剂配方的筛选

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1、第33卷第5期华中农业大学学报Vol.33No.52014年9月JournalofHuazhongAgriculturalUniversitySep.2014,45~49解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂配方的筛选谢兰芬121111,2吴毅歆何鹏飞邱昂肖春何月秋1.云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程中心,昆明650201;2.云南农业大学农学与生物技术学院,昆明650201摘要通过对润湿分散剂、黏度调节剂、UV保护剂、防腐剂、抗冻剂和消泡剂的筛选,确定5.0×109cfu/mL解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的最佳配方:Y2菌粉5.00%,农乳342.50%,D-4252

2、.00%,OP-101.50%,黄原胶0.15%,尿素0.15%,对羟基苯甲酸甲酯0.06%,甘油5.00%,正辛醇0.20%,水83.44%。经过湿法研磨后测定,解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的悬浮率达92.00%以上,且冷热贮藏稳定。关键词芽孢杆菌;悬浮剂;配方;筛选中图分类号S482.2+92文献标识码A文章编号1000-2421(2014)05-0045-05DOI:10.13300/j.cnki.hnlkxb.2014.05.033芽孢杆菌(Bacillusspp.)能够形成耐热、耐旱、烷基酚聚氧乙烯醚(OP-10);增稠剂:黄原胶、硅酸镁抗紫外线的芽孢,是研制生防菌剂

3、的良好材料。多铝、羧甲基纤维素(CMC);防冻剂:甘油;防腐剂:苯种解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)菌株因甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯;紫外(UV)保其具有控制植物病害、促进植物生长、提高作物产量护剂:黄原胶、羧甲基纤维素(CMC)、刚果红、淀粉、等优势,在生物防治制剂中显示出广阔的应用前糊精、尿素、抗坏血酸(VC)、纯牛奶;消泡剂:正辛醇;[1-3]景。解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(简称Y2,专利主要仪器:粉碎机、小型立式砂磨机、旋转粘度计、激号:ZL200310104195.6)是笔者所在实验室从小麦光粒度分析仪、台式离心机、恒温摇床等。根系土壤分离

4、的一株具有广谱抑菌促生长作用的生1.2制剂加工与初始比例[4-6]防菌株,能有效防治玉米大斑病、小斑病、圆斑病将Y2菌粉与一定比例助剂补足水混合均匀后等真菌性病害,促进多种植物插条生根,是一种很好经砂磨机砂磨4h后制成各种不同的悬浮剂。初始的生物防治制剂,但其制剂较单一,目前仅有可湿性制剂成分配比(质量百分数,下同):原粉5.00%、润粉剂产品。为克服Y2可湿性粉剂颗粒较大、易于湿分散剂总计≤10.00%、紫外保护剂0.30%、防腐沉降和分散性较差等缺点,笔者筛选并确定了Y2剂0.30%、防冻剂5.00%、消泡剂0.20%。悬浮剂的最佳配方,旨在为其产品的商业化生产提1.3配方的筛选供

5、理论依据。1)润湿分散剂。采用流点法筛选润湿分散剂品[7]种,试验重复4次。选用对供试原粉流点值较低1材料与方法的润湿分散剂进行下一步试验,按悬浮剂配制方法,1.1供试材料配制几个样品,测定样品悬浮剂的各项指标,确定润供试菌株:解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2菌粉,芽湿分散剂组合及用量。孢含量≥1.0×1011cfu/g,芽孢率≥95%;润湿分散2)增稠剂。按照配方要求,将粘度调节剂按不剂:烷基萘磺酸缩聚物钠盐(MorwetD-425)、亚甲同的含量制成样品。将样品经(54±2)℃贮存14d基双萘磺酸钠(NNO)、聚乙烯醇(PVA)、苯乙基酚后,测定各样品的倾倒性、流动性及分层情况。聚氧

6、乙烯醚(农乳602)、烷基芳基聚氧乙烯聚氧丙烯3)紫外保护剂。将保护剂按0.30%比例添加醚(农乳34)、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(吐温-80)、到发酵液中,混合均匀并分别稀释后涂布在LB平收稿日期:2014-03-28基金项目:国家自然科学基金项目(30660007)、科技部国际合作项目(2009DFA32360)和昆明市校企合作项目(09H130301)谢兰芬,博士研究生.研究方向:生物农药.E-mail:xlf19711@163.com通信作者:何月秋,博士,教授.研究方向:植物病害生物防治.E-mail:ynfh2007@163.com46华中农业大学学报第33卷板上,置于距离

7、紫外灯40cm处,分别照射30、60、2结果与分析90s后统计存活率。以不加保护剂作对照,每个处理重复4次。保护效能指数=(处理芽孢存活率-2.1润湿分散剂的筛选对照芽孢存活率)/(100-对照芽孢存活率)。1)润湿分散剂的流点。在预试验助剂与Y2生4)防腐剂。以上述配方为基础,加入不同种类物相容的基础上,选择7种生物相容性较好的润湿和含量的防腐剂,配制不同的样品。将样品经室温分散剂,用流点法测定各自流点,比较其润湿分散能贮存14d后,测定产品

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