富硒酵母对ccl4肝损伤小鼠免疫功能的影响

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1、万方数据118·论著·!堑盟!鲤Z=墨Z!墨绁胞蔓坌王鱼痤堂盘查(些i翌』鱼!!丛!!!堡婴!翌!12呈鲤里：箜(型文章编号：1007—8738(2009)02—0118—03富硒酵母对CCl4肝损伤小鼠免疫功能的影响张国蓉，王燕，刘安军(天津科技大学食品工程与牛物技术学院，天津300457)r——————II_—__——‘’[摘要】目的：研究富硒酵母对CCI。肝损伤小鼠免疫功能的影响。方法：将50只小鼠随机分为空白组、模型组、硒酵母组、维生素E(VE)组和混合组(混合喂食硒酵母和VE)，每组10只。空白组

2、和模型组灌胃蒸馏水，硒酵母组灌胃富硒酵母，VE组灌胃VE，混合组同时灌胃和硒酵母组、VE组等鼍的酵母和VE，连续30d。实验结束后一次性给予8g／LCCl。的香油溶液5mL／kg，空白组给香油。然后测定小鼠T和B淋巴细胞转化率、NK细胞活性和巨噬细胞的吞噬功能。结果：富硒酵母能够显著提高小鼠T和B淋巴细胞转化率、NK细胞活性和巨噬细胞的吞噬功能，且和VE具有协同作用。结论：富硒酵母能提高CCl。肝损伤小鼠的免疫功能。[关键词]富硒酵母；CCI。肝损伤小鼠；NK细胞；巨噬细胞[中图分类号]R332[文献标识码

3、]B硒是动物和人体所必需的微量元素之一，大约有40多种疾病症状与缺硒有关。与无机硒相比，有机硒具有毒性小，吸收率高和效果好等优点，而生物态有机硒的吸收比合成有机硒更好更安全，因此研发生物硒产品具有重要意义。我们以本实验摩制备的有机硒一硒酸精氨酸(ASe)为硒添加剂，用酿酒酵母发酵制得富硒酵母，并从免疫方面对富硒酵母对CCl。肝损伤小鼠的保护作用进行了研究，为这种新型硒添加剂的应用打下良好的实验基础。1材料和方法1．1材料硒酵母由ASe制备，硒含昔为1189．662斗g／L；维生素E(VitaminE，VE)

4、购自天津中新药业集团股份有限公司；CCI。为分析纯；雌性昆明小鼠(许可证号：SCXK-(军)2002—001)50只，体质量18～22g，购于军事医学科学院实验动物中心。1．2方法1．2．1分级及给药小鼠适应饲养1周后，随机分为空白组、模型组、硒酵母组、VE组和混合组(混合喂食硒酵母和VE)。按DRI推荐量作为小鼠硒的灌胃量，即30雌／(d·kg)，用硒的鼍换算为鲜酵母的食用毯；VE的灌胃量为硒推荐剂量的200倍，即2．8ms／(d·kg)，用香油稀释。灌胃时空白组和模型组灌胃蒸馏水，混合组同时灌胃和硒酵母

5、组、VE组等量收稿日期：2008—08—24；接受日期：2008—10—13基金简介：天津市应用基础及前沿技术研究计划重点项目(2009年)作者简介：张国蓉(1970一)，女，天津人，教授，博士Tel：022-60601437；E—mail：grzha

6、lg@tust．edu．cn的酵母和VE，连续30d。实验期间每2d称1次体重，并根据小鼠体重变化调整灌胃剂鼍。实验结束后1次性给予8S／LCCI。的香油溶液5mL／kg，空白组给香油。24h后，眼球取血，离心后取血清，待测生化指标。1．2．2小鼠脾细胞悬液

7、的制备及脾淋巴细胞活力的检测将各组小鼠无菌条件下取出脾脏，剪成5—10mm3大小的组织块，将组织块研磨，通过200目的不锈钢网桶，再用RP．MIl640培养液离心洗涤2次，制得单细胞悬液，计数。用RPMll640培养液调整细胞密度为1×10“’／L。在96孔板每孔内加入100IxL细胞悬液，再分别加人含ConA(测T细胞刺激指数)和LPS(测B细胞刺激指数)的RPMll640培养液(不含酚红，终浓度为5ms／L)100汕，于50mL／LCO。37℃下培养48h。再加入MrIT液100¨．L使终浓度为0．5g

8、／L。继续培养4h，离心(1500r／min，15rain)，弃上?菏，加入二甲基亚砜，每孔150IxL。酶标仪于570aria处测吸光度(A)值。1．2．3小鼠外周血NK细胞活性的测定采用司传平的方法分离小鼠外周血NK细胞““。用100mL／LFCS．RPMll640培养液将NK细胞数调至2×109／L；同时将传代良好的K562细胞数调至1×108／L。在96孔板的每：fL)J11K562细胞100IxL，效应细胞100斗L，对照孑L反应加同镑效应细胞或靶细胞，同培养液将总体积调至200Ixl．，每孔内加

9、MTr(0．5g／L)10txL，37。C、50ml／Lc02孵育箱内培养4h，离心(1500r／min，15rain)，弃上清。存每孔内加入二甲基哑砜150IxL，溶解MTT还原产物，微型振荡器5rain，酶标仪测定各管A铷值，求出各组平均值以杀伤百分率(％)表示NK细胞活性。求出各管的平均值以杀伤百分率(％)表示NK活性。NK细胞活性=[1一(实验孔A值一效应孔A值)／靶细胞对照孔A值]×100％。1．2．4