知母总黄酮提取工艺的研究

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1、知母总黄酮提取工艺的研究作者：闻永举，能力强，申秀丽【摘要】目的建立知母中总黄酮提取工艺，为知母总黄酮开发和利用提供依据。方法对提取方法、提取溶剂、提取时间进行研究，采用紫外分光光度法测定知母中总黄酮含量。结果知母中总黄酮较佳提取工艺为：0%乙醇超声提取0min。结论该方法简便、快速、准确，可作为知母中总黄酮提取及含量测定方法。【关键词】知母；紫外分光光度法；总黄酮；芒果苷Abstract：ObjectiveToestableamethodofextractiontechnologyoftotalflavonoidstooffer

2、abasisforAnemarrhena'sdevelopment.MethodsItwasstudiedonmethod,solvent,timeofextractionofAnemarrhena'statolflavonoidsandwasdeterminedtatolflavonoids'contentofAnemarrhenabyUV-spectrophotometry.ResultsItwasbestextractiontechnologyofUltrasonicExtractiontotalflavanoidsfor0

3、minby0%methodwassimple,quick,andaccurated,andsuitabletoextractanddeterminetotalflavonoids'contentofAnemarrhena.Keywords：Anemarrhena；UV-spectrophotometry;Totalflavonoids；Mangiferin知母为百合科植物知母AnemarrhenaasphodelloidesBge.的干燥根茎。中医理论认为，知母性寒，味苦、甘；入肺、肾、胃经；具有清热泻火、生津润燥功能。临床用于外

4、感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘［1］等症。研究表明知母中富含皂苷、黄酮类化合物［2］，其总黄酮又以芒果苷含量最高［3］。具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解热、抗炎、降低转氨酶等生理活性［4，5］，芒果苷是其止咳的有效成分。对于知母的化学研究，文献多偏重其皂苷类成分提取分离纯化研究，忽视了知母另一类有效成分——总黄酮类成分研究。因此，很有必要对知母总黄酮进行提取工艺研究。1仪器与试药仪器精密天平BS224S；UV-4501S紫外分光光度计(天津市港东科技发展有限公司)；超声清洗机SK8210LHC。

5、试药知母；芒果苷为对照品；乙醇、甲醇均为分析纯。方法与结果.1实验条件与方法的建立.对照品的选择很多文献报道中药制剂中总黄酮的含量测定多数采用芦丁作为对照品。采用芦丁作为对照品，解决了部分中药或中药制剂中本身缺少黄酮对照品的问题，在没有合适的对照品情况下，也不失一种测量总黄酮的可行的方法。芒果苷是知母中含量较高的黄酮类化合物，是其清热作用的有效成分，同时还具有抗炎、抗病毒、抗氧化、免疫抑制、利尿、预防肥胖等作用。因此，用知母中含量较高且具有抗病毒作用的专属性活性成分作为对照品来测定知母总黄酮的含量更加有意义。.最大吸收波长的选择N

6、aNO2-Al3-NaOH比色法测定总黄酮的原理［6］，是黄酮母核所含有的游离羟基在NaNO2-Al存在的条件下与金属铝离子形成络合物而显色，在波长00nm左右有最大吸收。本实验中所用的对照品是知母中主要黄酮类成分芒果苷对知母总黄酮进行含量测定。因此将芒果苷溶液及知母总黄酮提取液显色后在00～400nm处用可见-紫外分光光度计扫描，知母总黄酮和芒果苷均在58nm有最大吸收波长，结果见图1。故选择含量测定的检测波长为5nm。Ⅰ知母总黄酮紫外吸收波谱图Ⅱ芒果苷的紫外吸收波谱图图1知母总黄酮、芒果苷的最大紫外吸收波谱图.2对照品溶液的制

7、备取芒果苷适量，于0℃减压干燥至恒重，精密称定，加0％乙醇溶解，制成每毫升含μg溶液，即得。.3线性关系实验精密吸取混合对照品溶液贮备液1，2，5，10，15，2ml，分别置于0ml量瓶中，加0％乙醇稀释到刻度，摇匀，即得。分别取上述溶液，进行测定，以溶液浓度与吸收度比值进行回归，分别得到回归方程为：芒果苷：Y=，表明芒果苷在～μg/ml，范围内线性关系良好，芒果苷线性关系见图。图芒果苷线性关系图.4提取方法的选择.回流提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加甲醇0ml，水浴回流提取h，滤过，用少量甲醇洗涤药渣及

8、容器，滤液置于同一100ml量瓶中，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀，取溶液5ml，置于0ml量瓶中，加0％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。.超声提取法取知母粗粉1g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声提取0min，放冷，用甲醇补足至刻